[发明专利]刺囊酸衍生物及其在制备抗肿瘤的药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种从天然中药中获得的刺囊酸的衍生物制备方法，确切的说是一种以中药提取化学成分为先导化合物，制备一系列衍生物，以抗肿瘤活性为指标进行结构修饰，属于医药领域。

背景技术

刺囊酸是从豆科植物皂荚(Gleditsia Sinensis Lam.)的干燥成熟果实中经提取、纯化、分离、酸降解而获得的一种五环三萜类化合物(赵全成，南敏伦等，刺囊酸的制备方法、药物制剂及医药新用途，ZL03100676.0)，此专利描述了刺囊酸的制备方法，并且具有扩张冠状动脉的药理作用，可用于预防和治疗冠心病、心绞痛、心肌缺血等疾病。赵全成、赫玉芳、南敏伦等研究的以刺囊酸为主要成分的中药5类(原二类)新药皂荚通络胶囊(临床批件号：2005L02276)已经进行临床研究。同时，本研究团队研究表明，刺囊酸及总皂苷元具有抑制α-葡萄糖苷酶的作用(皂角总苷元及刺囊酸在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂的药物中的应用，200910067094.3)。据文献报道一些五环三萜类化合物，如熊果酸、齐墩果酸等也具有较强的抗肿瘤活性(中国民族民间医药，2009年，12期，14-15)。本发明人进一步研究表明，刺囊酸具有抗肿瘤的活性，因此，本发明的目的在于对刺囊酸化合物进行结构改造，制备一系列衍生物，以期寻找对肿瘤细胞株生长有更强的抑制作用的新的五环三萜类衍生物。根据我国常见肿瘤发病 疾病，选择了前列腺癌、肺癌、肝癌、宫颈癌、胃癌、乳腺癌等肿瘤细胞，进行抗肿瘤活性实验，从而进行药效学评价。

在本发明完成之前，还没有文献报道刺囊酸的衍生物具有抑制肿瘤细胞生长的作用，也未发现刺囊酸的衍生物在制备抗肿瘤药物应用的报道。

发明内容

本发明在于提供一种以刺囊酸为先导化合物合成一系列具有抗肿瘤作用的刺囊酸衍生物。

本发明的目的是通过以下技术方案得以实现：

1、乙醇提取豆科植物皂荚(Gleditsia Sinensis Lam.)的干燥成熟果实，经纯化、分离、酸降解，分离而获得刺囊酸(Echinocystic acid)。

2、将刺囊酸溶于CH₂Cl₂中，缓慢滴加各种酰氯，再加入三乙胺，常温条件下搅拌，待反应完全，减压回收溶剂，干燥，得粗产物。粗产物先用二氯甲烷-石油醚重结晶，再用硅胶柱分离纯化(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)，得白色粉末状结晶1-8。

其中R为

以上所述的一种具有抗肿瘤活性的刺囊酸衍生物，可用于制备治疗肿瘤疾病的药物。

本发明的特点为：对天然产物刺囊酸进行化学修饰，得到一系列与刺囊酸结构相似的衍生物，经药理实验证明，具有对肿瘤细胞明显的抑制作用，且衍生物活性优于母体化合物刺囊酸。

本发明的突出贡献在于以刺囊酸为先导化合物制备得到一系列新化合物，并经药效学实验证明，衍生物具有很强的抗肿瘤的活性， 并且活性强于阳性对照药5-氟尿嘧啶。体现了本发明的技术进步和创新性。

刺囊酸及衍生物对肿瘤细胞的抑制作用，这些药理作用，通过以下药效学试验例得到证实。

细胞 人宫颈癌细胞(Hela)、人小细胞肺癌(NCI-H446)、人乳腺癌细胞(MCF-7)、人胃癌细胞(SGC-7901)、人肝癌细胞(BEL-7402)、前列腺癌细胞(DU 145)等6种细胞系均购自吉林省肿瘤医院。

药品及试剂 刺囊酸及各衍生物为本实验室自制；四甲基偶氮唑盐(MTT)为Sigma公司产品；青霉素G钾盐为Sigma公司产品；硫酸链霉素Sigma公司产品；HEPES为Sigma公司产品；DMSO为Sigma公司产品；胰酶为Difco公司；新生牛血清(FBS)为北京元亨圣马生物技术研究所产品；RPMI-1640培养基为Hyclone公司产品。

仪器 CK2TRC-3荧光倒置显微镜，日本OLYMPUS产品；D-63450-CO₂培养箱，德国Hera公司产品；FCANF129004酶标仪，澳大利亚TECAN公司产品。