[发明专利]泊沙康唑中间体Z及其基因毒性杂质的分离与测定方法

说明书

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种泊沙康唑中间体Z及其相关基因毒性杂质的分离与测定方法。

背景技术

泊沙康唑是一种广谱三唑类抗真菌药，可用于预防侵袭性曲霉菌和念珠菌感染，同时可用于治疗口咽念珠菌病，包括伊曲康唑和/或氟康唑难治性口咽念珠菌病。泊沙康唑中间体Z(泊沙康唑粗品)化学名为4-[4-[4-[4-[[(3R,5R)-5-(2,4-difluorophenyl)tetrahydro-5-(1H-1,2,4-triazol-1-ylm ethyl)-3-furanyl]methoxy]phenyl]-1-piperazinyl]phenyl]-2-[(1S,2S)-1-ethyl-2-h ydroxypropyl]-2,4-dihydro-3H-1,2,4-triazol-3-one，分子式C₃₇H₄₂F₂N₈O₄，分子量700.78，其结构式如下所示：

基因毒性杂质是指化合物本身直接或者间接损伤细胞DNA，导致生物体产生基因突变或者发生体内诱变，具有致癌性或者潜在倾向。具有基因毒性作用的基团一般具有亲电试剂的性质，这些基团在生理条件下同体内核酸、蛋白质或其他重要成分中的亲核中心发生取代反应，使这些成分发生不可逆的损伤，表现为毒性、致突变或致癌等作用。表现为毒性、致突变或致癌等作用的基团举例如下：

在生产过程中，可能产生基因毒性杂质的环节包括新药合成、原料纯化、储存运输(与包装物接触)等，故在新药合成阶段应该指明涉及到的所有具有基因毒性或有致癌性的化学物质，如所用试剂、中间体、副产品等。更进一步，在药物活性物质中没有出现的基因毒性反应物和有基因毒性结构的物质，都应该被考虑。在泊沙康唑的合成过程中，其中间体Z中可能存在由关键起始原料带入的基因毒性杂质：对甲苯磺酸甲酯和对甲苯磺酸乙酯。泊沙康唑中间体Z中的基因毒性杂质来源于关键起始原料SM₁，合成SM₁过程中用到的对甲苯磺酰氯会水解产生对甲苯磺酸甲酯和对甲苯磺酸乙酯，SM₁合成路线如下所示：

根据EMA《基因毒性杂质限度指南》(2006年)规定，应对基因毒性杂质在泊沙康唑中的含量进行严格控制，按泊沙康唑最大日计量和最长用药时间计算该类杂质的限度应控制不超过0.015％。因此，对于泊沙康唑来 说，应控制其关键中间体Z中基因毒性杂质的含量，从而有效地保障泊沙康唑原料和制剂的质量安全可控。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种分离泊沙康唑中间体Z及其相关基因毒性杂质的方法，该方法能够实现泊沙康唑中间体Z及相关基因毒性杂质的有效分离，从而有效控制关键中间体Z中基因毒性杂质的含量；本发明的目的之二在于提供一种高效液相色谱法分离测定泊沙康唑中间体Z及相关基因毒性杂质的方法，利用高效液相色谱法，能够高效、精确的实现中间体Z及相关基因毒性杂质的分离与测定，对泊沙康唑原料及其制剂的质量安全可控具有重要意义。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

分离泊沙康唑中间体Z及相关基因毒性杂质的方法，所述的方法采用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以溶剂A与溶剂B的混合物为流动相进行分离，所述溶剂A为水，所述溶剂B为甲醇、乙腈、异丙醇中的一种或多种。

本发明所述的方法适用于上述的泊沙康唑中间体Z及相关基因毒性杂质的分离，可用于单独分离某一种物质，也可同时分离泊沙康唑中间体Z及相关基因毒性杂质。

本发明所述的分离泊沙康唑中间体Z及相关基因毒性杂质的方法，优选的，所述方法特别适合基因毒性杂质为对甲苯磺酸甲酯和/或对甲苯磺酸乙酯的分离。

作为优选的方案，所述溶剂B为甲醇或乙腈。

本发明还提供了一种高效液相色谱法分离测定泊沙康唑中间体Z及相关基因毒性杂质的方法，具体步骤如下：取供试品加稀释剂溶解制备成供试品溶液，取供试品溶液进样，流动相洗脱，进行高效液相色谱分析，记录色谱图，按照面积归一化法计算供试品中所含泊沙康唑中间体Z及相关基 因毒性杂质的含量；所述高效液相色谱分析采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，所述流动相为溶剂A与溶剂B的混合物，所述溶剂A为水，所述溶剂B为甲醇、乙腈、异丙醇中的一种或多种。