[发明专利]与家蚕核型多角体病毒感染相关的microRNA的应用

说明书

本发明公开了一种与家蚕核型多角体病毒感染相关的microRNA的应用。所述的应用为bmo‑miR‑277‑5p在制备检测家蚕核型多角体病毒感染的试剂盒中的应用，或者所述的应用为bmo‑miR‑277‑5p在抑制基因表达中的应用，所述的基因转录后的mRNA具有如SEQ ID NO.12所示序列的3’UTR。本发明开拓了家蚕microRNA特别是bmo‑miR‑277‑5p的新用途，可为研究家蚕与核型多角体病毒的互作机制提供新的研究方向，同时为家蚕核型多角体病毒的诊断、防治提供新的思路。

技术领域

本发明涉及家蚕microRNA，尤其涉及一种与家蚕核型多角体病毒感染相关的microRNA的应用。

背景技术

家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus，BmNPV)属昆虫杆状病毒科(Baculoviridae)，核型多角体病毒属(Nucleopolyhedrovirus)，病毒粒子为杆状，基因组大小约为128kb,编码约100多个基因。该病毒传染性极强，难以控制，暴发频繁，给养蚕业造成了巨大的经济损失。在宿主昆虫细胞内,BmNPV DNA的复制及基因的表达是一种有序发生的级联事件，其感染过程依赖于其基因的阶段性调节和依次表达，即前一阶段的基因产物直接或间接的反式作用于下一阶段的基因转录。病毒感染早期，转录激活因子可以诱导杆状病毒基因的表达并选择性的调控特定种类的宿主基因的表达从而建立感染。感染晚期阶段主要是病毒DNA的复制和结构基因的表达。

MicroRNA是一类小的非编码RNA，广泛存在于动物、植物和病毒等生物中。RNA干扰(RNA interference)作为一种先天的抵抗病毒感染的防御机制最早是在植物中发现的,随后发现，RNA干扰在昆虫自身免疫体系中也扮演着重要角色。microRNA广泛参与包括生长发育、细胞凋亡、肿瘤、抗病毒等一系列重要的生命过程。研究表明，宿主编码的microRNA在受到病毒感染后，其表达水平会发生显著变化。差异表达的microRNAs可能是由宿主免疫应答反应引起或由病毒感染诱导的调控因子导致。另一方面，病毒编码的miRNA也可调控自身与病毒复制相关基因或宿主免疫相关基因，从而进一步增加了宿主-病毒互作的复杂性。

目前，与家蚕核型多角体病毒感染相关的microRNA研究较少，因此本领域需要鉴定出相关microRNA或者对已知microRNA功能及用途进行研究，为研究家蚕与核型多角体病毒的互作机制提供基础，同时为家蚕核型多角体病毒的检测及防治提供新的思路。

发明内容

发明目的：针对现有技术中存在的问题，本发明开拓了家蚕microRNA特别是bmo-miR-277-5p的新用途。

本发明通过以下技术方案予以实现：

本发明提供了bmo-miR-277-5p在制备检测家蚕核型多角体病毒感染的试剂盒中的应用。

bmo-miR-277-5p为家蚕(Bombyx mori)的一种microRNA，与家蚕核型多角体病毒感染紧密相关，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，GenBank登录号为LM381765.1。实验证明，bmo-miR-277-5p在感染BmNPV的家蚕中的表达水平显著高于正常家蚕中的表达水平。因此，可利用bmo-miR-277-5p，制备试剂盒，通过检测bmo-miR-277-5p的表达水平，判断家蚕是否被BmNPV所感染。

所述家蚕为家蚕的幼虫。

本发明还提供了一种检测家蚕核型多角体病毒感染的试剂盒，该试剂盒用于检测家蚕中bmo-miR-277-5p的表达水平。通过检测bmo-miR-277-5p与对照的表达水平，进行比较，判断家蚕是否被BmNPV所感染：如果待判定家蚕的bmo-miR-277-5p的表达水平显著高于对照的表达水平，则提示家蚕已被BmNPV感染，否则则提示未被BmNPV感染。本发明中，所述的显著是指具有统计学意义上的显著性，p＜0.05。