[发明专利]一种纤维素定向三段水解制备纤维寡糖的方法在审

专利信息
申请号: 201610057509.9 申请日: 2016-01-27
公开(公告)号: CN105524958A 公开(公告)日: 2016-04-27
发明(设计)人: 朱汉静;朱汉生;刘镏;陈冬劲 申请(专利权)人: 江苏康维生物有限公司
主分类号: C12P19/14 分类号: C12P19/14;C12P19/04
代理公司: 北京天奇智新知识产权代理有限公司 11340 代理人: 韩洪
地址: 224200 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 纤维素 定向 水解 制备 纤维 寡糖 方法
【权利要求书】:

1.一种纤维素定向三段水解制备纤维寡糖的方法,其特征在于:包括如下步骤:

步骤一、制备反应原液:按1:20的比例称取底物纤维素和无菌水,将底物 纤维素和无菌水倒入温度可设定的无菌容器中,得到底物纤维素浓度为5% 的反应原液;

步骤二、设定温度及pH值:调节无菌容器中的反应原液的pH值为7.0,设 定无菌容器的温度恒为10℃;

步骤三、底物原位吸附:称取一定量的里氏木霉纤维素酶,投入经步骤二处 理后的反应原液中,搅拌均匀后得到吸附体系,吸附时间为30min;

步骤四、固液分离处理:当吸附时间到达30min时,将无菌容器中的吸附体 系快速倒入离心机中离心处理,分离除去吸附体系中的液相,得到含有适合 于纤维寡糖制备的低β-葡萄糖苷酶纤维素酶的离心沉渣;

步骤五、第一次水解处理:将步骤四得到的含有低β-葡萄糖苷酶纤维素酶的 离心沉渣投至无菌容器中,在无菌容器中补加无菌水至原反应原液的体积, 并调节无菌容器中的反应体系的pH值为4.80,无菌容器的温度设定为50℃, 水解反应一段时间后,采用固液分离方法将液相移除;

步骤六、第二次水解处理:在经过步骤五第一次水解处理得到的固体渣中补 加一定无菌水至原反应原液的体积,调节无菌容器中的反应体系的pH值为 4.80,无菌容器的温度设定为50℃,继续反应一段时间后,采用固液分离方 法将液相移除;

步骤七、第三次水解处理:在经过步骤六第二次水解处理后得到的固体渣中 继续补加一定无菌水至原反应原液的体积,调节无菌容器中的反应体系的pH 值为4.80,无菌容器的温度设定为50℃,继续反应一段时间后,采用固液分 离方法再次将液相移除;

步骤八、提纯纤维寡糖:收集经步骤五、步骤六和步骤七固液分离后的液相, 并提取液相中的纤维寡糖反应产物,提纯得到纤维寡糖,可直接用于饲料添 加剂。

2.如权利要求1所述的一种纤维素定向三段水解制备纤维寡糖的方法,其特征 在于:所述的步骤一中的底物纤维素为低聚木糖生产废渣。

3.如权利要求1所述的一种纤维素定向三段水解制备纤维寡糖的方法,其特征 在于:所述的步骤三中里氏木霉纤维素酶的用量为15FPIU/g底物纤维素。

4.如权利要求1所述的一种纤维素定向三段水解制备纤维寡糖的方法,其特征 在于:所述的步骤五、步骤六和步骤七中的固液分离方法包括离心法和过滤 法。

5.如权利要求1所述的一种纤维素定向三段水解制备纤维寡糖的方法,其特征 在于:所述的步骤五第一次水解处理、步骤六第二次水解处理和步骤七第三 次水解处理的总水解时间为24h。

6.如权利要求5所述的一种纤维素定向三段水解制备纤维寡糖的方法,其特征 在于:所述的步骤五第一次水解处理中的水解时间为6h,步骤六第二次水解 处理中的水解时间为6h。

7.如权利要求5所述的一种纤维素定向三段水解制备纤维寡糖的方法,其特征 在于:所述的步骤五第一次水解处理中的水解时间为6h,步骤六第二次水解 处理中的水解时间为8h。

8.如权利要求5所述的一种纤维素定向三段水解制备纤维寡糖的方法,其特征 在于:所述的步骤五第一次水解处理中的水解时间为8h,步骤六第二次水解 处理中的水解时间为8h。

9.如权利要求5所述的一种纤维素定向三段水解制备纤维寡糖的方法,其特征 在于:所述的步骤五第一次水解处理中的水解时间为6h,步骤六第二次水解 处理中的水解时间为12h。

10.如权利要求6所述的一种纤维素定向三段水解制备纤维寡糖的方法,其特征 在于:所述的步骤五第一次水解处理中的水解时间为24h。

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