[发明专利]一种纤维素定向二段水解制备纤维寡糖的方法

权利要求书

1.一种纤维素定向二段水解制备纤维寡糖的方法，其特征在于：包括如下步骤：

步骤一、制备反应原液：按1：20的比例称取底物纤维素和无菌水，将底物 纤维素和无菌水倒入温度可设定的无菌容器中，得到底物纤维素浓度为5％ 的反应原液；

步骤二、设定温度及pH值：调节无菌容器中的反应原液的pH值为7.0，设 定无菌容器的温度恒为10℃；

步骤三、底物原位吸附：称取一定量的里氏木霉纤维素酶，投入经步骤二处 理后的反应原液中，搅拌均匀后得到吸附体系，吸附时间为30min；

步骤四、固液分离处理：当吸附时间到达30min时，将无菌容器中的吸附体 系快速倒入离心机中离心处理，分离除去吸附体系中的液相，得到含有适合 于纤维寡糖制备的低β-葡萄糖苷酶纤维素酶的离心沉渣；

步骤五、第一次水解处理：将步骤四得到的含有低β-葡萄糖苷酶纤维素酶的 离心沉渣投至无菌容器中，在无菌容器中补加无菌水至原反应原液的体积， 并调节无菌容器中的反应体系的pH值为4.80，无菌容器的温度设定为50℃， 水解反应一段时间后，采用固液分离方法将液相移除，得到固体渣；

步骤六、第二次水解处理：在经过步骤五第一次水解处理得到的固体渣中继 续补加一定水至原反应原液的体积，调节无菌容器中的反应体系的pH值为 4.80，无菌容器的温度设定为50℃，继续反应一段时间后，采用固液分离方 法再次将液相移除；

步骤七、提纯纤维寡糖：收集经步骤五和步骤六固液分离后的液相，并提取 液相中的纤维寡糖反应产物，提纯得到纤维寡糖，可直接用于饲料添加剂。

2.如权利要求1所述的一种纤维素定向二段水解制备纤维寡糖的方法，其特征 在于：所述的步骤一中的底物纤维素为低聚木糖生产废渣。

3.如权利要求1所述的一种纤维素定向二段水解制备纤维寡糖的方法，其特征 在于：所述的步骤三中里氏木霉纤维素酶的用量为15FPIU/g底物纤维素。

4.如权利要求1所述的一种纤维素定向二段水解制备纤维寡糖的方法，其特征 在于：所述的步骤五和步骤六中的固液分离方法包括离心法和过滤法。

5.如权利要求1所述的一种纤维素定向二段水解制备纤维寡糖的方法，其特征 在于：所述的步骤五第一次水解处理与步骤六第二次水解处理的总水解时间 为24h。

6.如权利要求5所述的一种纤维素定向二段水解制备纤维寡糖的方法，其特征 在于：所述的步骤五第一次水解处理中的水解时间为6h。

7.如权利要求5所述的一种纤维素定向二段水解制备纤维寡糖的方法，其特征 在于：所述的步骤五第一次水解处理中的水解时间为10h。

8.如权利要求5所述的一种纤维素定向二段水解制备纤维寡糖的方法，其特征 在于：所述的步骤五第一次水解处理中的水解时间为12h。

9.如权利要求5所述的一种纤维素定向二段水解制备纤维寡糖的方法，其特征 在于：所述的步骤五第一次水解处理中的水解时间为14h。

10.如权利要求6所述的一种纤维素定向二段水解制备纤维寡糖的方法，其特征 在于：所述的步骤五第一次水解处理中的水解时间为18h。