[发明专利]一种玉米小斑病病原物的快速检测方法在审
申请号: | 201610058100.9 | 申请日: | 2016-01-28 |
公开(公告)号: | CN105543382A | 公开(公告)日: | 2016-05-04 |
发明(设计)人: | 张猛;马庆周;耿月华;武海燕;于思勤 | 申请(专利权)人: | 河南农业大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04 |
代理公司: | 郑州优盾知识产权代理有限公司 41125 | 代理人: | 张绍琳;张真真 |
地址: | 450002 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 玉米 小斑病病 原物 快速 检测 方法 | ||
1.一种玉米小斑病病原物的快速检测方法,其特征在于,所述检测方法包括以下步骤:
(1)真菌菌丝的收集;
(2)真菌DNA的提取;
(3)PCR扩增:PCR反应体系为,正向引物X-EF和反向引物X-ER各1μL,DNA模板1μL,TaqPCRMasterMix12.5μL,ddH2O补至25μL;PCR反应程序为94℃预变性3min;94℃变性30s、52.9℃退火30s、72℃延伸30s,共32个循环;72℃延伸10min,4℃保存。
2.如权利要求1所述的玉米小斑病病原物的快速检测方法,其特征在于,所述正向引物X-EF序列如SEQIDNO:1所示,反向引物X-ER序列如SEQIDNO:2所示。
3.如权利要求1所述的玉米小斑病病原物的快速检测方法,其特征在于,所述正向引物和反向引物的浓度为5μmol/μL,DNA模板浓度为25ng/μL。
4.一种玉米小斑病的快速检测方法作为玉米叶片中小斑病病原菌早期监测的应用。
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