[发明专利]用于进行CVD风险评估的生物化学标志物

说明书

本申请是中国专利申请CN200880123912.0的分案申请，原申请是国际申请号PCT/ EP2008/064946于2010年7月2日进入中国国家阶段的申请。

技术领域

本发明涉及检测对心血管疾病诊断目的和疾病发展预后有价值的生物化学标志 物的测定，其包括指示由发生动脉粥样硬化和斑块不稳定性所导致的心血管事件风险的生 物化学标志物。

背景技术

心血管疾病(cardiovasculardisease，CVD)是世界范围内致病及死亡的首要原 因。目前，尚没有允许诊断并将患者归类为不同风险组以及允许诊断低风险患者的有效且 非介入性的诊断方法。诊断和预后工具主要由简单标志物的多变量分析构成，例如年龄、吸 烟情况和多种脂质和脂蛋白的浓度。

CVD涵盖数种临床综合征，主要有心绞痛、心肌梗死(冠状动脉栓塞)和中风。所有 这些综合征通常都是复杂动脉粥样硬化的后遗症。

动脉粥样硬化开始于童年阶段的内膜增厚，并发展成为动脉内膜中的脂肪条纹， 这些病变分别表征为I型和II型。脂肪条纹是动脉粥样硬化发展过程中最早的宏观可见病 变，其在所有种族和社会的几乎所有人类中发生。在非致病状态下，内皮细胞(endothelial cell，EC)对白细胞的粘附性相互作用有抗性。但是，动脉粥样化形成过程中动脉壁中促炎 症细胞因子以及积累的氧化脂蛋白的作用引发粘附分子的表达，例如主动脉EC表面上的细 胞间粘附分子(intercellularadhesionmolecule，ICAM)-1和血管细胞粘附分子 (vascularcelladhesionmolecule，VCAM)-1。这使得白细胞能被内皮表面捕获并移行进 血管壁的内膜部分。斑块的发生包括发生移位和凋亡的平滑肌细胞(smoothmusclecell， SMC)个数的增加，其导致基质周转(turnover)增加。受损的胶原蛋白合成可导致纤维帽削 弱并产生更易于破裂的动脉粥样硬化斑块；但是，大多数研究者认为，蛋白水解酶例如基质 金属蛋白酶(matrixmetallo-protease，MMP)及其它蛋白酶的作用对斑块破裂的风险有重 要的贡献(Clarkson和Kaplan509-28)。

斑块可分为两种不同类型：“脆弱的”和“稳定的”斑块。但是，对于详细的组织学分 析和对分子的认识，经常使用更详细的分类。斑块的发生有三个主要阶段：起始、脂肪条纹 和复杂/晚期斑块(StaryH.C.)。

动脉粥样硬化斑块在动脉内膜内发生，并可根据其组成和结构进行分类。这种分 类将病变分为8个类型(StaryH.C.)：

I.内膜中载有脂滴并被其增大的巨噬细胞(巨噬细胞源性泡沫细胞)增多。

II.巨噬细胞源性泡沫细胞与内膜SMC内的脂滴一起在蛋白聚糖层深部积累。泡沫 细胞层以脂肪条纹的形式可见。在II型病变中，单核细胞通过单核细胞趋化蛋白(主要是 MCP-1)穿透内皮细胞层，所述趋化蛋白在人粥样斑中过表达。早期病变类型(I型和II型)可 以在婴儿期开始，但不一定导致斑块破裂。此外，动脉粥样硬化的发展可以在形成III型病 变之后结束，斑块的形成是无法预测的(StaryH.C.)。

III.III型病变确定为处于脂肪条纹(II型)和粥样斑(IV型)之间的中间病变。这 些病变还含有胞外脂质的混合物，由此使得内膜深部肌肉弹性层中通常紧密相邻的SMC之 间的间距扩大。物质混合物可取代通常位于这里的蛋白聚糖和胶原纤维，但是这在动脉粥 样化形成的这一阶段造成的影响很小。