[发明专利]一种筛选hERG钾离子通道激动剂和毒性检测方法

权利要求书

1.一种融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白含有：

作为该融合蛋白N端的来自线虫ERG家族钾离子通道UNC-103蛋白N端第1～85位氨基酸残基之间的片段，且片段至少包含UNC-103蛋白N端第1～79位氨基酸残基；

hERG第369～889位氨基酸残基或第1～889位氨基酸残基；和

作为该融合蛋白C端的来自所述UNC-103蛋白C端第599～829位氨基酸残基；

其中，所述hERG的氨基酸序列如SEQ ID NO:18所示，和所述UNC-103蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:19所示。

2.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白还含有报告基因编码的可被检测的蛋白质或酶。

3.如权利要求2所述的融合蛋白，其特征在于，所述报告基因编码的可被检测的蛋白质为荧光蛋白。

4.如权利要求1-3中任一项所述的融合蛋白，其特征在于，所述UNC-103蛋白N端第1～85位氨基酸残基之间的片段由UNC-103蛋白N端第1位到第79、80、81、82、83、84或85位氨基酸残基组成。

5.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白为UNC-103蛋白N端第1～79位氨基酸残基、hERG第369～889位氨基酸残基或第1～889位氨基酸残基与UNC-103蛋白C端第599～829氨基酸残基组成的融合蛋白。

6.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述hERG第369～889位氨基酸残基或第1～889位氨基酸残基存在通道功能获得性的突变，其中，所述突变为A536W、A653T或A536W与A653T两者。

7.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述hERG第369～889位氨基酸残基或第1～889位氨基酸残基中存在：（1）通道功能获得性的突变，其中，所述突变为A536W、A653T或A536W与A653T两者；以及（2）导致hERG胞内运输障碍的突变，所述突变选自I31S、T65P、N470D、A561V、G601S和S818L中的一个或多个。

8.一种多核苷酸分子，其特征在于，所述多核苷酸分子的核苷酸序列选自：

（a）编码权利要求1－7中任一项所述的融合蛋白的多核苷酸序列；和

（b）与（a）的多核苷酸序列互补的序列。

9.如权利要求8所述的多核苷酸分子，其特征在于，所述多核苷酸分子的核苷酸序列如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示。

10.一种表达载体，其包含权利要求8或9所述的多核苷酸分子。

11.一种基因工程细胞，其包含权利要求8或9所述的多核苷酸分子或转入了权利要求10所述的表达载体。