[发明专利]一种高得率萝卜硫素的制备方法

说明书

技术领域

本发明公开了一种高得率萝卜硫素的制备方法，属于萝卜硫素提取领域。

背景技术

据世界卫生组织统计，目前全球每年因癌症死亡的人数高达700万，但至今为止，人们尚未找到攻克癌症的办法。因此，研究和控制肿瘤是当今生命科学领域的重大课题。流行病学及药理学研究表明：癌症发病率低的地方，人们饮食中的蔬菜、水果所占比例较大。究其原因，是蔬菜水果中存在一种或多种阻止或减缓癌症发展的活性成分，如番茄中的番茄红素、大豆制品中的大豆异黄酮、浆果中的鞣化酸以及十字花科蔬果中的萝卜硫素、吲哚类物质，均已证实具有良好的防癌抗癌作用。在众多含有抗癌活性成分的蔬菜中，十字花科（洋白菜、花茎甘蓝、球茎甘蓝、青花椰菜、芥蓝、白萝卜和高丽菜等）富含硫代葡萄糖苷（硫甙），其在蔬菜本身具有的黑芥子酶作用下能降解成异硫代氰酸盐类抗癌物质。

萝卜硫素属于异硫代氰酸盐中的一种，是至今为止蔬菜中发现的防癌抗癌能力最强的天然产物之一，对多种癌细胞有明显的阻断作用，并且具有抗菌、提高机体抗氧化能力和增强免疫力等药理作用，对人体无明显的不良反应，具有被开发成新型抗癌药或者保健品的潜力，具有广阔的市场前景，目前萝卜硫素主要来源于西兰花种子。

目前生产萝卜硫素的方法主要有化学合成法和植物提取法，化学合成法过程难以控制，合成的萝卜硫素为消旋体，药理活性明显偏低，功能减弱，具有一定的毒副作用，也难以实现工业化生产；而植物提取法虽没有毒副作用，但生产条件和工艺设备要求非常高，且得率较低。

除此以外，萝卜硫素本身很不稳定，温度、pH、光照都会对其稳定性产生影响，虽然可以从植物中提取的手段获得萝卜硫素，但是萝卜硫素在分离纯化的过程中非常容易降解，对生产条件和工艺设备要求非常高，而且萝卜硫素的保存、储藏、运输也存在很大困难。

因此，寻找一种合适的萝卜硫素生产方法，是非常有必要的。

发明内容

本发明主要解决的技术问题：针对目前萝卜硫素在生产的过程中，化学合成法难以控制，合成的萝卜硫素药理活性偏低，具有一定的毒副作用，而植物提取法虽可以从植物中以提取的手段获得萝卜硫素，但还是存在稳定性差、在分离纯化过程中非常容易降解、对生产条件和工艺设备要求非常高以及保存、储藏、运输困难的现状，提供了一种将萝卜和鳅鱼煮熟，待发霉后囤起，利用南风使其自行酸化，随后收集酸化液浸泡切碎的西兰花，并用乙醇对其进行抽提，得抽提液，最后将抽提液通过真空浓缩、冷冻干燥以及旋蒸，从而得到高得率萝卜硫素的制备方法。该方法操作简便，对设备要求低，制得的萝卜硫素不仅得率高、稳定性好、药理活性强，而且在分离纯化过程中不易降解，便于保存、储藏和运输，属于典型的绿色环保工艺。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：

（1）挑选500～600g无霉斑、无病虫害、无腐烂的白萝卜，用清水洗净外皮残留的污物后，用刀均匀切分成长5～8cm、厚2～3cm的条状，放于菠萝筛中沥去残留水份；

（2）选择5～7条个体重量在30～40g的鳅鱼，经宰杀、去头、去尾、内脏后，用清水反复清洗，直至无任何血水洗出，随后将洗后的鳅鱼切成长1～3cm的鱼块，放入煮锅中，并向其中加入上述步骤得到的白萝卜块以及白萝卜质量1～2倍清水，混合均匀，在90～100℃下沸煮30～35min，待沸煮结束，将煮后的混合物取出，放于容器中，用纱布遮盖，在温度为25～32℃，空气相对湿度为65～68％处，放置10～15天；

（3）待上述混合物产生霉菌时，用浓度为1.3mol/L的亚硫酸钠溶液，调节pH为5.6～6.3，每隔2h对混合物产生的霉菌进行一次淋洗，直至长出2～3cm菌丝时，停止淋洗，将其放入腌缸中，并在腌缸四周裹上一层厚稻草，上面铺上一层草连子，让其在4月份的南风下自行酸化20～25天，待酸化结束，取出酸化混合物，置于离心机中，在1200～1300r/min的转速下离心处理10～15min，去渣，收集酸化液；

（4）取300～400g新鲜西兰花，去除花梗和腐烂部分后，放入清水中洗净，随后将洗后的西兰花花球粉碎，过80～85目筛，得西兰花渣，置于反应釜中，并向反应釜中加入上述步骤收集得到的酸化液，使其完全浸没西兰花渣，在常温下密闭7～14天；