[发明专利]用于核酸检测的SERS传感器及其制备和多元检测方法在审
申请号: | 201610065688.0 | 申请日: | 2016-01-31 |
公开(公告)号: | CN105647788A | 公开(公告)日: | 2016-06-08 |
发明(设计)人: | 宋春元;汪联辉;杨琰君;杨博玥;苏邵 | 申请(专利权)人: | 南京邮电大学 |
主分类号: | C12M1/34 | 分类号: | C12M1/34;C12Q1/68 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 王月霞 |
地址: | 210046 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 核酸 检测 sers 传感器 及其 制备 多元 方法 | ||
1.用于核酸检测的SERS传感器,其特征在于,该传感器由固体SERS基片和核酸探针链 构成,核酸探针链通过金-硫键固定于固体SERS基片的表面,与目标核酸分子碱基互补配对 后,通过检测探针链上拉曼分子的SERS信号变化,实现对核酸的传感检测。
2.根据权利要求1所述的用于核酸检测的SERS传感器,其特征在于,所述固体SERS基片 为银纳米棒阵列型基片。
3.根据权利要求1所述的用于核酸检测的SERS传感器,其特征在于,所述的核酸探针链 3’端修饰巯基,5’端修饰染料分子,探针链中部分碱基序列互补可形成发卡型结构,部分碱 基序列与待检测核酸可互补配对。
4.根据权利要求1所述的用于核酸检测的SERS传感器,其特征在于,核酸探针链和目标 核酸分子数量相等,每个核酸探针链对应一个目标核酸分子,构成一组互补杂交双链结构。
5.权利要求1所述的用于核酸检测的SERS传感器的制备方法,其特征在于,包括如下步 骤:
1)制备固体SERS基片,然后用纯水多次冲洗;
2)取核酸探针链滴于固体SERS基片与固体SERS基片共培养,然后用缓冲液冲洗干净; 修饰探针链的SERS基底在缓冲液中浸泡,使DNA形态保持稳定;
3)用巯基己醇封闭基片表面裸露的位点,并用缓冲液轻轻冲洗干净,制备得到核酸检 测SERS传感器。
6.根据权利要求5所述的用于核酸检测的SERS传感器的制备方法,其特征在于,步骤2) 中所述探针链与固体SERS基片共培养的培养条件为在25℃,80%湿度环境中静置培养3h。
7.根据权利要求5所述的用于核酸检测的SERS传感器的制备方法,其特征在于,步骤2) 中浸泡时间为10~30min。
8.一种采用权利要求1所述的SERS传感器检测核酸的多元检测方法,其特征在于,将 SERS传感器与待测样品溶液共培养后,用缓冲液冲洗进行SERS测试得到SERS信号,对照工 作曲线计算得出待测样品中目标核酸的浓度。
9.根据权利要求8所述的SERS传感器检测核酸的多元检测方法,其特征在于,所述工作 曲线是将SERS传感器分别与含有多种目标核酸的不同浓度血清样品溶液共培养,得到不同 浓度样品检测的SERS信号强度,以核酸浓度为横坐标,以SERS信号强度变化量为纵坐标做 出工作曲线。
10.根据权利要求8所述的SERS传感器检测核酸的多元检测方法,其特征在于,所述 SERS传感器与待测样品溶液共培养条件为:在37℃,杂交反应2h。
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