[发明专利]一种辐射诱变边艺春兰获得叶艺新类型的方法

说明书

技术领域

本发明属于辐射花卉育种技术领域。

背景技术

“叶艺”性状能极大地提高兰花的观赏性，“叶艺兰”在东南亚市场十分受欢迎。中国兰（春兰、蕙兰、建兰、墨兰、寒兰等）的“叶艺”以金色、黄色、黄绿色、乳白色和白色为多见，有透明、半透明、不透明之分，色斑的形态、位置多种多样。中国兰中“叶艺”品种最多的是台湾的垂叶墨兰，仅“达摩”的芽变种，现已有绿叶品、中斑艺、爪艺、宝艺、中透艺、鹤艺等20～30种叶艺类型。

日本春兰的叶艺类型也十分丰富，目前市场上出现的叶艺春兰主要为日本春兰，我国传统春兰品种的选育注重瓣型，“叶艺”品种十分稀少，“叶艺”类型也很少，主要为边艺。春兰“叶艺”品种主要从野生种中筛选，到目前为止，还未有人工选育出春兰“叶艺”品种的报道。

辐射诱变育种是园艺新品种选育常用的方法，目前通过⁶⁰Co-γ射线辐射诱变选育中国兰突变体研究，在国内已取得了一定进展，但通过辐射诱变春兰边艺品种选育叶艺新类型，这在以往的研究文献中还未发现类似的报道。

发明内容

发明目的在于克服春兰叶艺品种依靠从野生种中筛选的现状，提供一种高效、系统选育边艺春兰叶艺新类型的方法。

本发明通过以下步骤实现：

1）于气温为0℃～10℃时节，选择生长健壮、叶芽大小为2～5mm的边艺春兰绿色植株在20℃～25℃控温日光温室内培养一周。

气温为0℃～10℃时，叶芽开始萌发，叶芽大小2～5mm左右，此状态的叶芽辐射诱变效果好，变异的叶艺性状稳定、类型丰富。选择材料为边艺春兰品种，是因为有边艺性状的春兰经过辐照诱变后才出现叶艺类型的高效突变，根据试验辐照剂量为5Gy，新苗叶艺变异率达70.95%；辐射剂量为10Gy，新苗叶艺变异率达33.07%。

因为春兰在此季节叶芽虽然开始萌发但温度比较低，细胞生长分化的速度相对较缓慢，但在20℃～25℃的温度下能促进叶芽的萌动生长，细胞的分化发育状况好，辐射诱变效果好。

2）脱盆，抖落盆土，不碰伤小芽，将相连的3～5苗分成一簇，农用链霉素600-800倍液浸泡2小时后，取出各簇植株材料阴干至轻微脱水。由于本发明主要变异器官为叶芽，因此辐照前要保护好小芽，相连3～5苗分成一簇既保证了小苗的存活率，又提高了小苗叶芽的变异率；真菌性杀菌剂与细菌性杀菌剂的混合液对植株的细菌性病害和真菌性病害进行预防,捞出后白菌清使植株均匀涂裹一层保护膜，能在辐照过程中更好的保护植株和叶芽被真菌、细菌等感染；阴干稍脱水能使植株根茎更柔韧，提高植株辐照后的成活率和生长势。

3）以5Gy～10Gy的剂量，对植株材料进行⁶⁰Co-γ辐照；辐照剂量小于5Gy，植株新苗叶艺不明显，辐照剂量大于10Gy，植株成活率低，叶芽停止发育，死亡率高。

4）取辐照后的植株材料进行栽培，每簇一盆，使用小号松鳞为栽培基质，上盆后浇透水；使用小号松鳞是因为该基质保水性和透水性好，植株材料成活率最高。

5）栽培第二天扒开植株材料假鳞茎周围的基质，将用直径0.5-1cm、厚1mm浸透6-BA的脱脂棉贴于叶芽上，重新盖上栽培基质，在均温20℃～25℃控温日光温室内培养一周；为保证6-BA的浓度，采用浸透6-BA的脱脂棉贴于叶芽上，该措施能促进叶芽的成苗率，脱脂棉过大过潮会加大新芽的坏死率，过小过干达不到对叶芽长效刺激，6-BA浓度5ppm，是促进叶芽成苗率的最适浓度。在均温20℃～25℃控温日光温室培养一周能促进辐照后材料生长势的恢复。

6）将植株材料移至阳光温室，每周浇水1～2次，浇水5～6次后取出脱脂棉，正常培养；取出脱脂棉，6-BA的作用已完成，取出后叶芽周围更透气，更适宜生长。

7）利用ISSR技术对兰花辐射诱变苗的遗传变异进行分析，比较突变体与原品种谱带，两者有差异，推测诱变苗是由基因突变引起，变异类型可稳定遗传；

新叶艺的选育主要看无性繁殖的植株表型性状是否稳定，性状稳定便可以作为新品系，本发明利用ISSR技术对兰花辐射诱变苗的遗传变异进行分析主要是为了从分子学角度证明春兰⁶⁰Co-γ辐射诱变产生的叶艺是可以稳定遗传的，使本发明跟有理论基础，无性繁殖的变异株不用每个植株进行ISSR技术分析。

8）取变异的叶艺新类型植株通过无性繁殖性状稳定后，改用硬质料栽培。更有利于叶艺性状的稳定表达。

本发明所具有的优点和效果：