[发明专利]活性核桃肽的提取方法在审
申请号: | 201610068898.5 | 申请日: | 2016-02-01 |
公开(公告)号: | CN105603029A | 公开(公告)日: | 2016-05-25 |
发明(设计)人: | 孙存宝;李多伟;甘全明;郭秋宝 | 申请(专利权)人: | 陕西广泽农业科技管理有限公司 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/34;C07K1/14 |
代理公司: | 陕西增瑞律师事务所 61219 | 代理人: | 张瑞琪 |
地址: | 710018 陕西省西*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 活性 核桃 提取 方法 | ||
技术领域
本发明属于生物工程技术领域,涉及活性核桃肽的提取方法。
背景技术
核桃肽可促进免疫组织的功能恢复,提高机体免疫力,有促进核苷吸收及运转的作用,可调节肠道菌群,是能有效协同益生菌发挥作用的益生元,还有很好的醒酒、护肝功能。核桃肽具有良好的溶解性并具有高浓度低粘度的功能特性,是生产高蛋白流体食品很好的原料。核桃肽所具有的生理活性如易消化吸收、促进微生物发酵、抗氧化活性可以作为生产发酵食品的原料、添加剂,或功能性食品的基料。
目前,核桃肽生产技术大多直接采用核桃油粕水热回流提取、酶解、活性炭脱色、葡聚糖凝胶分离、蒸发浓缩和真空干燥这样的工艺过程,其生产提取率低,提取、浓缩过程的高温严重破坏了核桃肽的活性和色泽,而且提取过程的残渣严重污染了环境,致使我国核桃肽得不到有效地推广和应用。
发明内容
针对上述现有技术的不足,本发明提供一种活性核桃肽的提取方法。
本发明采用如下技术方案,活性核桃肽的提取方法,按照以下步骤实施:
步骤1、对冷榨油后的干核桃油粕进行筛选后得到渣料a,再对渣料a进行两次超声提取,得到上清液c;
步骤2、对上清液c进行膜浓缩,并得到浓缩液a;
步骤3、对浓缩液a进行两次酶解,得到酶解液;
步骤4、对酶解液进行膜分离,得到小分子量多肽溶液;
步骤5、对小分子量多肽溶液用纳滤膜脱盐浓缩,得到浓缩液b;
步骤6、再对浓缩液b进行脱色得到脱色处理后的溶液,记为溶液e;
步骤7、再将溶液e用纳滤膜脱盐浓缩得到浓缩液c,将浓缩液c真空浓缩以及喷雾干燥后得核桃肽产品。
进一步的,步骤1中,使用筛孔直径为0.425mm的筛网对冷榨油后的干核桃油粕粉碎料进行筛选,并得到渣料a。
进一步的,步骤1中,用质量百分浓度为0.1%的Na2S03水溶液浸泡渣料a20~40min,并得到混合溶液,记为溶液a,其中,Na2S03水溶液与渣料a的重量比为6:1;再向溶液a加入清水后得到混合溶液,记为溶液b,其中,Na2S03水溶液和清水的总重与渣料a的重量比为20:1;
再用稀碱溶液将溶液b的PH值调到7.5~8.5,并在50℃~60℃的温度下进行超声搅拌提取1h,通过管式离心机离心得上清液a和渣料b;再向渣料b加入PH值为8.0-9.0的水得到溶液c,加入的水与渣料b的重量比为20:1,在50℃~60℃的温度下对溶液c进行超声搅拌提取1h,通过管式离心机离心得上清液b,最后将上清液a和上清液b混合得到上清液c。
进一步的,步骤2中膜浓缩的具体方法为:将上清液c用陶瓷膜过滤,得到滤液a,再用纳滤膜将滤液a浓缩至底物浓度为3.5~4.5%,并得到浓缩液a。
进一步的,步骤3中酶解的具体方法为:向浓缩液a中加入质量百分浓度为3‰的碱性蛋白酶得到溶液d,并在50-55℃的温度下对溶液d进行搅拌酶解2小时,使溶液d的PH值保持为8.5~9.5,待溶液d的PH值降到7-8之间后,再加入质量百分浓度为3‰的中性蛋白酶,并在50-55℃的温度下搅拌酶解2小时,得到酶解液。
进一步的,步骤4中,将酶解液用稀酸调整至弱酸性,再对酶解液进行沉淀及离心后得到上清液d;将上清液d用稀碱液调整为中性后,再用超滤膜超滤,得到小分子量多肽溶液。
进一步的,步骤4中,所述酶解液用稀酸调整至PH值为4-5,再沉淀25~35分钟后离心得上清液d。
进一步的,步骤6脱色的具体方法为:将非极性大孔树脂用体积百分浓度为95%的乙醇浸泡24小时,再用水洗至无醇味,再用摩尔浓度1.0mol/L的NaOH溶液浸泡2小时,再用水洗至中性,再用摩尔浓度1.0mol/LHCl溶液浸泡2小时,最后水洗非极性大孔树脂至中性,再用经上述处理后的大孔树脂对浓缩液b进行脱色,得到脱色处理后的溶液。
进一步的,步骤7中,将浓缩液c真空浓缩到密度为1.1~1.3Kg/cm3,并对浓缩液c进行喷雾干燥后得核桃肽产品。
本发明的有益效果是,从核桃油粕中提取核桃肽的生产工艺具有提取率高,产品活力强,色泽纯正,以及生产过程操作简单、安全,成本低,对环境无污染和便于工业化大规模生产等突出的优点。
具体实施方式
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