[发明专利]一种与大豆种皮颜色紧密连锁的分子标记及其应用

权利要求书

1.一种检测或辅助检测待测大豆种皮颜色性状的引物，由引物对1、引物对2、引物对3和引物对4组成的成套引物；

所述引物对1为由序列1所示的单链DNA分子和序列2所示的单链DNA分子组成；

所述引物对2为由序列3所示的单链DNA分子和序列4所示的单链DNA分子组成；

所述引物对3为由序列5所示的单链DNA分子和序列6所示的单链DNA分子组成；

所述引物对4为由序列7所示的单链DNA分子和序列8所示的单链DNA分子组成；

所述大豆种皮颜色性状为绿色、黄色、黑色或褐色。

2.一种检测或辅助检测待测大豆种皮颜色性状的PCR试剂，包括权利要求1所述的引物；所述大豆种皮颜色性状为绿色、黄色、黑色或褐色。

3.根据权利要求2所述的PCR试剂，其特征在于：所述引物对1、所述引物对2、所述引物对3和所述引物对4在所述PCR试剂中的终浓度均为0.2μmol/L。

4.一种检测或辅助检测待测大豆种皮颜色性状的试剂盒，包括权利要求1所述的引物或权利要求2或3所述的PCR试剂；所述大豆种皮颜色性状为绿色、黄色、黑色或褐色。

5.权利要求1所述的引物或权利要求2或3所述的PCR试剂或权利要求4所述的试剂盒在检测或辅助检测待测大豆种皮颜色性状中的应用；

所述大豆种皮颜色性状为绿色、黄色、黑色或褐色。

6.权利要求1所述的引物或权利要求2或3所述的PCR试剂或权利要求4所述的试剂盒在制备检测或辅助检测待测大豆种皮颜色性状的产品中的应用；

所述大豆种皮颜色性状为绿色、黄色、黑色或褐色。

7.根据权利要求1所述的引物或权利要求2或3所述的PCR试剂或权利要求4所述的试剂盒或权利要求5或6所述的应用，其特征在于：所述大豆种皮颜色性状为绿色、黄色、黑色或褐色。

8.一种检测或辅助检测待测大豆种皮颜色性状的方法，为如下步骤：

D1)分别用权利要求1中所述的引物对1、引物对2、引物对3和引物对4对待测大豆的基因组DNA进行PCR扩增，得到4种PCR扩增产物；

D2)检测所述4种PCR扩增产物的大小，

若引物对1对应的PCR扩增产物大小为224bp，且引物对2对应的PCR扩增产物大小为258bp，且引物对3对应的PCR扩增产物大小为248bp或288bp，且引物对4对应的PCR扩增产物大小为294bp或300bp，则待测大豆种皮颜色为或候选为绿色；

若引物对1对应的PCR扩增产物大小为224bp，且引物对2对应的PCR扩增产物大小为270bp，且引物对3对应的PCR扩增产物大小为248bp或288bp，且引物对4对应的PCR扩增产物大小为294bp或300bp，则待测大豆种皮颜色为或候选为黄色；

若引物对1对应的PCR扩增产物大小为186bp，且引物对2对应的PCR扩增产物大小为258bp或270bp，且引物对3对应的PCR扩增产物大小为288bp，且引物对4对应的PCR扩增产物大小为300bp，则待测大豆种皮颜色为或候选为黑色；

若引物对1对应的PCR扩增产物大小为186bp，且引物对2对应的PCR扩增产物大小为258bp或270bp，且引物对3对应的PCR扩增产物大小为248bp，且引物对4对应的PCR扩增产物大小为300bp；或引物对1对应的PCR扩增产物大小为186bp，且引物对2对应的PCR扩增产物大小为258bp或270bp，且引物对3对应的PCR扩增产物大小为248bp或288bp，且引物对4对应的PCR扩增产物大小为294bp，则待测大豆种皮颜色为或候选为褐色。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：所述PCR扩增的退火温度为47℃。

10.权利要求1所述的引物或权利要求2或3所述的PCR试剂或权利要求4所述的试剂盒或权利要求8或9所述的方法在大豆种质资源鉴定和/或大豆育种中的应用。