[发明专利]一种基因环路诱导表达调控方法

权利要求书

1.一种基因环路诱导表达系统在制备基因环路诱导表达调控产品中的应用，其特征在于，所述基因环路诱导表达系统包括启动装置、信号感受装置、信号处理装置、信号报告效应装置、关闭装置；当所述信号感受装置感知外界信号，所述信号感受装置被激活，通过所述信号处理装置将所述外界信号转化为细胞内部信号，并激活细胞内信号通路，磷酸化所述信号处理装置中的转录激活因子，从而激活所述信号报告效应装置中的启动子表达目的基因；

其中，所述启动装置提供用于被所述信号感受装置识别的外界信号；所述外界信号为小分子化合物；

所述信号感受装置含有能识别所述启动装置的小分子化合物的受体，所述受体能使细胞感知外界信号，并激活细胞内信号通路；

所述信号处理装置使细胞将其感知到的所述外界信号转化为细胞内部信号；所述信号处理装置含有转录激活因子；

所述信号报告效应装置使细胞在所述信号感受装置和所述信号处理装置的协同下将所述外界信号以报告基因表达的方式体现出来；所述信号报告效应装置含有单一报告或含有两种报告，所述单一报告是用于检测报告系统基因表达或蛋白表达；所述两种报告是用于同时检测报告系统基因表达和蛋白表达；

所述关闭装置用于解除所述信号报告效应装置中重组转录因子与其特异识别的操纵子之间的结合，从而终止目的基因的表达；

其中，所述启动装置为齐墩果酸OA或熊果酸UA；所述信号感受装置为GpBAR1；所述信号处理装置为TetR-hCREB1，其中，所述TetR是一种四环素阻遏蛋白，能与其特异性DNA序列结合，可作为信号处理装置的转录激活因子的DNA结合域，所述TetR与转录因子CREB1之间由连接肽融合，同时所述TetR与CREB1之间前后位置可以互换，即所述TetR可以连接到CREB1的C端，也可以连接到N端，并且都有活性，所述信号处理装置可在细胞中合成TetR-CREB1重组转录因子蛋白，其用于能使细胞将外界刺激信号转化为细胞内部信号，及激活细胞内cAMP信号通路；所述信号报告效应装置为P_hCMVmin*-Reporter，所述P_hCMVmin*为TetR蛋白特异结合的最小启动子；所述关闭装置为DOX。