[发明专利]鉴定大麦糯性性状的特异性引物及方法在审
申请号: | 201610074062.6 | 申请日: | 2016-02-02 |
公开(公告)号: | CN105525021A | 公开(公告)日: | 2016-04-27 |
发明(设计)人: | 马建;兰秀锦;孙敏;郑有良;魏育明;江千涛;刘亚西;祁鹏飞;陈国跃 | 申请(专利权)人: | 四川农业大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君 |
地址: | 611130 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鉴定 大麦 性状 特异性 引物 方法 | ||
1.鉴定大麦糯性性状的特异性引物,其特征在于,所述特异性 引物的核苷酸序列为:
正向引物:5’-AGGCATGCAGCAGCGTGAGT-3’;
反向引物:5’-CACTGATCGTCAGTGTGAGT-3’。
2.一种鉴定大麦糯性性状的方法,其特征在于,所述方法包括, 以待测大麦基因组DNA为模板,利用权利要求1所述的特异性引物 进行PCR扩增获得扩增片段,检测扩增片段的长度,当扩增片段的 长度为760bp时鉴定待测大麦具有糯性性状。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在,所述PCR扩增的反 应程序为:94~95℃预变性5~8min;94~95℃变性45~60s,60~63℃ 退火40~50s,71~73℃延伸40~50s,共30~35个循环;71~74℃终延 伸4~6min。
4.根据权利要求2或3所述所述的方法,其特征在于,所述PCR 扩增的反应体系为:5μL10×PCR缓冲液、1.5UExTaqTMDNA聚 合酶、2mmol/lMgCl2、0.2mmol/LdNTP、上下游引物各150ng,100ng 模板DNA、双蒸水加至反应体系总量为50μL。
5.一种大麦糯性性状检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒含 有权利要求1所述的特异性引物。
6.权利要求1所述的引物在大麦waxy基因型鉴定中的应用,其 特征在于,所述应用包括利用权利要求1所述的特异性引物进行PCR 扩增获得扩增片段,检测扩增片段的长度,当扩增片段的长度为760bp 时鉴定待测大麦的waxy基因为糯性基因型,当扩增片段的长度为970 bp时鉴定待测大麦的waxy基因为非糯性基因型。
7.权利要求1所述的特异性引物在大麦种质资源改良中的应用。
8.权利要求1所述的特异性引物在大麦育种中的应用。
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