[发明专利]用于MRI造影成像的白蛋白磁性纳米粒及其制备方法

说明书

本发明涉及白蛋白磁性纳米粒的MRI造影成像作用及其制备方法。白蛋白溶解在除过氧的水中；预通氮气除去反应体系中的氧气；先逐滴滴入稀氨水溶液使体系的pH值为10～12，再逐滴滴入无水氯化铁和硫酸亚铁的混合溶液，铁的总浓度为1.4～1.8M/L，铁与白蛋白的摩尔比为2.4×10⁴～3.1×10⁴：1；在氮气保护条件下搅拌，升温65～75℃加热30～60分钟，反应结束后温度降至室温进行下一步的纯化；将制得的纳米粒用分子量为8kD～14kD的透析袋透析24h，得到纯净的白蛋白磁性纳米粒。纳米粒子水合粒径为50～90nm，适合应用于MRI，药物载体，免疫测定等生物学应用。是生物医学应用的理想材料。

技术领域

这种白蛋白磁性纳米粒属于生物医学领域，涉及白蛋白磁性纳米粒的MRI造影成像作用及其制备方法。

背景技术

白蛋白是人体血浆中含量最多的蛋白质，以白蛋白作为稳定剂制备的磁性纳米粒具有高度生物相容特性和无毒的特点。这种白蛋白磁性纳米粒子具有广泛的体内应用途径，例如：MRI,免疫测定，药物传递，组织分离，细胞靶向等，是生物医学应用的理想材料。应用于生物医学的纳米粒子的关键因素是具有合适的粒径和方便简单的纯化过程便于工业化生产。目前常用的合成方法有：(1)共沉淀法；(2)高温反应法；(3)电化学反应法；(4)微乳法；(5)流动注射合成法；(6)多元醇法；(7)气溶胶法；(8)超声波分解法。其中共沉淀法是最简单最有效的合成磁性纳米粒的方法，我们是在传统的共沉淀法上做了一些改善，使合成的纳米粒子具有合适的粒径、窄的粒径分布以及简单的纯化过程，提高纳米粒子的稳定性，使其更广泛的应用于医学的各个领域。

白蛋白作为血浆中最丰富的蛋白质，具有调节血浆渗透压，作为某些金属离子和抗肿瘤药物的载体，延长药物的体内循环时间，提高药物稳定性等优点，近年来，它在体内成像研究领域成为了热点。

发明内容

为了解决目前共沉淀法制备四氧化三铁纳米粒的工序复杂和制备的产物不易分离纯化等缺点，我们在传统的共沉淀制备方法上简化了实验步骤，制备的纳米粒的水合粒径为50～90nm，性质相对稳定，纯化方法简单易行。

为了达到上述目的，本实验的技术方案如下：

用于MRI造影成像的白蛋白磁性纳米粒的制备方法，其步骤如下：

(a)称取白蛋白溶解在除过氧的水中；预通氮气除去反应体系中的氧气；先逐滴滴入稀氨水溶液使体系的pH值为10～12，再逐滴滴入无水氯化铁和硫酸亚铁的混合溶液，铁的总浓度为1.4～1.8M/L，铁与白蛋白的摩尔比为2.4×10⁴～3.1×10⁴：1；在氮气保护条件下搅拌，升温65～75℃条件下加热30～60分钟，反应结束后温度降至室温进行下一步的纯化；

(b)将制得的纳米粒用分子量为8kD～14kD的透析袋透析24h，透析的过程中换4～6次超纯水得到纯净的白蛋白磁性纳米粒。

本发明制得的白蛋白磁性纳米粒；其白蛋白直接附着在四氧化三铁表面，形成的白蛋白磁性纳米粒，水合粒径为50～90nm，

所述水是爆沸10分钟后的除氧水。所述三价铁与二价铁的摩尔比为1:1.8～2。所述搅拌速率为700～1000rmp。

所述步骤(b)中透析24h中，前12h时间每隔3～4h换一次超纯水，后12h时间每隔6～8小时换一次超纯水。

本发明是在氨水形成的碱性环境中加入适当比例的二价和三价铁在室温下反应形成四氧化三铁，白蛋白通过物理吸附直接附着在四氧化三铁表面，紧接着65～75℃加热使形成的纳米粒活化而制成的稳定的白蛋白磁性纳米粒。

本发明将纯化后的纳米粒使用粒度测定仪(DLS)测定纳米粒的水合粒径，使用透射电镜(TEM)测定纳米粒观察纳米粒的形态。