[发明专利]一种红色荧光标记氧化石墨烯的方法有效
申请号: | 201610075351.8 | 申请日: | 2016-02-03 |
公开(公告)号: | CN105731441B | 公开(公告)日: | 2017-11-17 |
发明(设计)人: | 胡智文;苏孝鹏;王秉 | 申请(专利权)人: | 浙江理工大学 |
主分类号: | C01B32/194 | 分类号: | C01B32/194 |
代理公司: | 杭州杭诚专利事务所有限公司33109 | 代理人: | 尉伟敏 |
地址: | 310018 浙江省杭州市下*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 红色 荧光 标记 氧化 石墨 方法 | ||
1.一种红色荧光标记氧化石墨烯的方法,其特征在于采用如下步骤:
1)将罗丹明B荧光素溶解于二甲基亚砜中配制得A溶液,避光保存,其中罗丹明B荧光素与二甲基亚砜的用量比为(0.5~1)/(1~5)mol/mL;
2)将甲状腺球蛋白添加到pH为8.5~9.5的碳酸钠水溶液中,并在室温下搅拌至完全溶解,配制得B溶液,其中甲状腺球蛋白与碳酸钠水溶液用量比为(0.1~0.5)/(10~20)mol/mL;
3)将所述A溶液转移至注射器中,将所述B溶液转移至容器中,在避光条件下将1~5体积份的A溶液滴加至10~20体积份的B溶液中,配制得C溶液,接着将所述C溶液转移至透析袋中,然后将所述透析袋浸没于pH为8.5~9.5的碳酸钠水溶液中进行透析,直至透析袋中溶液由浑浊转变为清澈透明后,取出透析袋,得到罗丹明B标记的甲状腺球蛋白溶液;
4)取氧化石墨烯分散于水中配制成1.5~2.5mg/mL的D溶液,再将所述罗丹明B标记的甲状腺球蛋白溶液加水稀释浓度至3~6mg/mL,得到E溶液;在避光条件下将所述D溶液与所述E溶液按体积比1:(0.8~1.2)的比例混合处理12~60h,然后将混合溶液经离心分离后取固体,制得红色荧光标记 氧化石墨烯。
2.如权利要求1所述的一种红色荧光标记氧化石墨烯的方法,其特征在于,步骤1)中罗丹明B荧光素与二甲基亚砜的用量比为(0.7~0.8)/(2~4)mol/mL。
3.如权利要求2所述的一种红色荧光标记氧化石墨烯的方法,其特征在于,步骤2)中甲状腺球蛋白与碳酸钠水溶液用量比为(0.2~0.4)/(14~16)mol/mL。
4.如权利要求1所述的一种红色荧光标记氧化石墨烯的方法,其特征在于,步骤3)中所述A溶液与所述B溶液的体积比为1:5。
5.如权利要求1或4所述的一种红色荧光标记氧化石墨烯的方法,其特征在于,步骤3)中将所述A溶液滴加至所述B溶液的滴加速度为0.05-0.15mL/sec。
6.如权利要求1所述的一种红色荧光标记氧化石墨烯的方法,其特征在于,在步骤3)的透析过程中,所述透析袋的截留分子量为7000-10000;所述C溶液与碳酸钠水溶液的体积比为1:(50-150)。
7.如权利要求1所述的一种红色荧光标记氧化石墨烯的方法,其特征在于,步骤4)中的氧化石墨烯经过预处理:将氧化石墨烯在盐酸水溶液中浸泡处理,然后经离心分离得到预处理的氧化石墨烯。
8.如权利要求7所述的一种红色荧光标记氧化石墨烯的方法,其特征在于,所述盐酸水溶液的浓度为1mol/L,所述氧化石墨烯与盐酸水溶液用量比为(2~3):( 20~30)mg/mL,浸泡时间为4~8h,离心转速为14000~18000g。
9.如权利要求1或7所述的一种红色荧光标记氧化石墨烯的方法,其特征在于,步骤4)的离心分离过程具体为:将所述混合溶液在18000-22000g的转速下离心4-6min,分离出固体后,用PBS缓冲液对剩余溶液进行洗涤,然后反复进行离心、分离、洗涤,直至不再有固体分离出为止。
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