[发明专利]同时检测牛乳多种蛋白与营养价值的蛋白芯片及其试剂盒

权利要求书

1.一种同时检测牛乳多种蛋白与营养价值的蛋白芯片，其特征在于：包括固相载体和 阵列式分布于固相载体上的β-酪蛋白单克隆抗体、乳铁蛋白单克隆抗体和β-乳球蛋白单克 隆抗体；其中所述的单克隆抗体以共价键固定在固相载体的表面；所述的固相载体经醛基 化修饰。

2.根据权利要求1所述的一种同时检测牛乳多种蛋白与营养价值的蛋白芯片，其特征 在于：所述的固相载体是指经过醛基化修饰的载玻片。

3.根据权利要求1所述的一种同时检测牛乳多种蛋白与营养价值的蛋白芯片，其特征 在于：所述的β-酪蛋白单克隆抗体是小鼠抗β-酪蛋白单克隆抗体；所述的乳铁蛋白单克隆 抗体是指小鼠抗乳铁蛋白单克隆抗体；所述的β-乳球蛋白单克隆抗体是小鼠抗β-乳球蛋白 单克隆抗体。

4.根据权利要求1所述的一种同时检测牛乳多种蛋白与营养价值的蛋白芯片，其特征 在于：还包括阳性对照、阴性对照、空白对照；所述的阳性对照、阴性对照分别通过共价键固 定于经过醛基化修饰的固相载体表面。

5.根据权利要求4所述的一种同时检测牛乳多种蛋白与营养价值的蛋白芯片，其特征 在于所述的阳性对照是指兔多克隆抗体—兔IgG；所述的阴性对照是指小牛血清白蛋白；所 述的空白对照是指磷酸盐缓冲液。

6.权利要求1-5任一所述的一种同时检测牛乳多种蛋白与营养价值的蛋白芯片的制备 方法，其特征在于其步骤为：a、选择醛基化微阵列固相载体，确定点阵的排列方式和点样位 置；b、配制点样液，c、用点样针按点阵的排列方式将β-酪蛋白单克隆抗体、乳铁蛋白单克隆 抗体、β-乳球蛋白单克隆抗体与阴性对照、阳性对照及空白对照分别以接触式点样方式直 接点印于固相载体上；d、37℃保温静置16—20h；e、以5%小牛血清白蛋白溶液封闭1小时，f、 用含有1‰吐温20的磷酸缓冲液洗涤3次，室温晾干，g、抽真空包装，4℃保存。

7.一种同时检测牛乳多种蛋白与营养价值的蛋白芯片的试剂盒，其特征在于包括权利 要求1-5任一所述的用于检测β-酪蛋白、乳铁蛋白、β-乳球蛋白的蛋白芯片；还包括样本稀 释液、浓缩洗涤液、标准品混合液、空白对照液、抗体检测液和Cy3荧光标记羊抗兔IgG工作 液。

8.根据权利要求7所述的一种同时检测牛乳多种蛋白与营养价值的蛋白芯片的试剂 盒，其特征在于所述的样本稀释液是指3%小牛血清白蛋白溶液；所述的浓缩洗涤液是指含 有1%吐温20的磷酸盐缓冲液；所述的空白对照液是指3%小牛血清白蛋白溶液；所述的标准 品混合液是指以3%小牛血清白蛋白溶液做样本稀释液溶解配制的β-酪蛋白、乳铁蛋白、β- 乳球蛋白的混合液；标准品混合液中三种蛋白的浓度分别为：β-酪蛋白为2.5mg/ml，乳铁蛋 白2μg/ml，β-乳球蛋白为2μg/ml。

9.根据权利要求7或8所述的一种同时检测牛乳多种蛋白与营养价值的蛋白芯片的试 剂盒，其特征在于所述的抗体检测液是指以3%小牛血清白蛋白溶液做样本稀释液溶解配制 的兔抗β-酪蛋白多克隆抗体、兔抗乳铁蛋白多克隆抗体和兔抗β-乳球蛋白多克隆抗体的混 合液；所述的混合液中各种兔多克隆抗体的质量体积浓度（μg/ml）分别为：兔抗β-酪蛋白多 克隆抗体5μg/ml、兔抗乳铁蛋白多克隆抗体0.36μg/ml、兔抗β-乳球蛋白多克隆抗体0.5μg/ ml；所述的Cy3荧光标记羊抗兔IgG工作液是指Cy3标记的羊抗兔IgG与3%小牛血清白蛋白溶 液按1：1000稀释成的二抗工作液。