[发明专利]一种实体肿瘤组织消化液

说明书

技术领域

本发明涉及细胞分离领域，具体涉及一种实体肿瘤组织消化液。

背景技术

在对实体肿瘤组织的细胞生物学特性进行分析研究(如细胞放射敏感性检 测等)时，需先将样品组织块制备成分散的单细胞悬液。只有当样品组织中的 各种细胞成分处在单细胞状态下，才能有效地对其进行各种细胞效应的检测分 析，而细胞悬液质量的好坏与消化液配方和消化方法密切相关。现有技术中的 各消化液对肿瘤组织的消化效果尚有待改进。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种实体肿瘤组织消化液，能有效、快速 地将实体肿瘤样品分散为单细胞。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：

一种实体肿瘤组织消化液，由以下重量份的组分制备而成：

I型胶原酶25-35份、I型蛋白激酶45-55份、分散酶1-4份、透明质酸 酶15-25份、泊洛沙姆10-30份、缓冲液202.56-320.35份、浓度为15-85mg/mL 的超顺磁性纳米粒子溶液10-20份。

优选地，所述缓冲液包含5-15mmol/L三羟甲基氨基甲烷-盐酸， 0.4-0.6mmol/L二氨基乙烷四乙酸，5-15mmol/L氯化钠、0.015μg·μl^-1-0.055 μg·μl^-1甲基磺酸乙酯。

优选地，由以下重量份的组分制备而成：

I型胶原酶25-30份、I型蛋白激酶45-50份、分散酶1-3份、透明质酸 酶15-20份、泊洛沙姆10-25份、缓冲液202.56-300份、浓度为15-80mg/mL的 超顺磁性纳米粒子溶液10-15份。

优选地，由以下重量份的组分制备而成：

I型胶原酶30份、I型蛋白激酶50份、分散酶2.5份、透明质酸酶20 份、泊洛沙姆20份、缓冲液261.455份、浓度为50mg/mL的超顺磁性纳米粒 子溶液15份。

本发明具有以下有益效果：

细胞膜损伤小、细胞悬液分散度好，且操作方便、效果稳定。

具体实施方式

为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行 进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明， 并不用于限定本发明。

以下实施例中的表面羧基化的超顺磁性纳米粒子制备方法如下：

将8-10份的FeCl3·6H2O溶于140-150份mL去离子水，搅拌加热至70 -80℃；将5-6份的FeCl2·4H2O溶于10mL去离子水，过滤；将两种溶液混 合后剧烈搅拌，快速加入18ml浓氨水，之后逐滴加入4.66g油酸，继续在70℃ 的温度下快速搅拌1小时；制得的溶液用酒精沉淀、洗涤2-3次，再用去离 子水洗涤至中性，然后加入160-180ml的浓度为10-15mg/mLKMnO4溶液，超 声波清洗仪超声振荡8h，最后将制得的溶液用去离子水洗涤2-3次，冷冻干燥 后得表面羧基化的超顺磁性纳米粒子。

实施例1

一种实体肿瘤组织消化液，由以下重量份的组分制备而成：

I型胶原酶25份、I型蛋白激酶45份、分散酶1份、透明质酸酶15份、 泊洛沙姆10份、缓冲液202.56份、浓度为15mg/mL的超顺磁性纳米粒子溶液10 份。所述缓冲液包含5mmol/L三羟甲基氨基甲烷-盐酸，0.4mmol/L二氨基乙烷 四乙酸，5mmol/L氯化钠、0.015μg·μl^-1甲基磺酸乙酯。

实施例2

一种实体肿瘤组织消化液，由以下重量份的组分制备而成：

I型胶原酶35份、I型蛋白激酶55份、分散酶4份、透明质酸酶25 份、泊洛沙姆30份、缓冲液320.35份、浓度为85mg/mL的超顺磁性纳米粒 子溶液20份。所述缓冲液包含15mmol/L三羟甲基氨基甲烷-盐酸，0.6mmol/L 二氨基乙烷四乙酸，15mmol/L氯化钠、0.055μg·μl^-1甲基磺酸乙酯。

实施例3

一种实体肿瘤组织消化液，由以下重量份的组分制备而成：