[发明专利]一种高分散低酰基结冷胶的制备方法

权利要求书

1.一种高分散低酰基结冷胶的制备方法，其特征在于具体制备步骤为

（1）按重量份数计，取30～40份葡萄糖、15～20份蛋白胨、2～3份玉米浆干粉、18～22份牛肉膏、1.5～2.2份磷酸氢二钾、0.5～1.8份磷酸二氢钾及21～23份质量分数0.5％的氯化钠溶液，混合均匀后，将混合物放在紫外灯下杀菌消毒，得发酵培养基，用质量分数为2％的氨水调节发酵培养基pH至7.0；

（2）取1.0～1.5L上述pH调节完成后的发酵培养基放入3L发酵罐中，按接种量8～10％，将混合菌液放入发酵罐中，温度设定为30～35℃，转速设定为150～170r/min，发酵8～10天，所述的混合菌液为浓度为1.5×10⁸个/mL的伊乐藻假单胞菌菌液和浓度为0.6×10⁸个/mL的短小芽孢杆菌液按体积比1:1混合而成；

（3）待上述发酵结束后收集发酵液，将发酵液放入离心机中，在3000～5000r/min下离心分离5～8min，收集上清液，把上清液放入烧杯中，向烧杯中加入上清液体积30～35％无水乙醇，搅拌均匀；

（4）上述搅拌均匀后，放入水浴锅中，以5℃/min速率对烧杯进行升温，待温度升至35～45℃时，向烧杯中加入上清液质量2～4％复合蛋白酶，以转速200r/min进行保温搅拌1～2h，然后再以5℃/min速率继续升温至85～95℃，升温后用质量分数15％的氢氧化钾溶液调节pH为10.5～11.0，保温50～60min；

（5）待上述保温结束后自然冷却至室温，将烧杯中的混合物用醋酸纤维素滤膜进行过滤，收集过滤物放入烧瓶中，向烧瓶中加入过滤物体积2～3倍的无水乙醇，再加入过滤物质量2～3％壳聚糖，搅拌混合均匀，静置直至无絮凝物产生后过滤，收集过滤物；

（6）将上述所得的过滤物放入喷雾干燥机中进行喷雾干燥，收集干燥物放入烧杯中，向烧杯中加入70℃的水，搅拌直至干燥物完全溶解后停止加水，再向烧杯中加入干燥物质量6～8％的200目白土，搅拌30～40min后趁热减压过滤，收集过滤物放入喷雾干燥机中进行喷雾干燥，收集干燥物，即可得到高分散低酰基结冷胶。