[发明专利]快速检测辣椒素类物质的胶体金免疫层析试纸条、制备方法及其应用

权利要求书

1.快速检测辣椒素类物质的胶体金免疫层析试纸条，其特征在于：包括纸板，纸板的一面从上到下依次粘贴吸水垫、检测垫、金标垫和样品垫，相邻各垫在连接处交叠连接，所述检测垫以硝酸纤维素膜为基垫，硝酸纤维素膜上自上而下设置横向质控线和检测线，所述的质控线包被有兔抗鼠多克隆抗体，所述的检测线上包被辣椒素类物质包被抗原；所述金标垫横向喷涂有纳米金标记的抗辣椒素、二氢辣椒素、合成辣椒素通用单克隆抗体；所述抗辣椒素、二氢辣椒素、合成辣椒素通用单克隆抗体由保藏编号为CCTCC NO.C201534的杂交瘤细胞株YQQD8分泌产生。

2.根据权利要求1所述的快速检测辣椒素类物质的胶体金免疫层析试纸条，其特征在于：所述的吸水垫长16～18mm，宽3～4mm，检测垫长23～30mm，宽3～4mm；金标垫长6～12mm，宽3～4mm；样品垫长12～15mm，宽3～4mm，相邻各垫的交叠长度为1～3mm。

3.根据权利要求1所述的快速检测辣椒素类物质的胶体金免疫层析试纸条，其特征在于：所述检测垫上的检测线与硝酸纤维素膜上沿的间距为8～15mm，所述检测线与质控线的间距为5～10mm。

4.根据权利要求1所述的快速检测辣椒素类物质的胶体金免疫层析试纸条，其特征在于：所述的辣椒素类物质包被抗原的分子结构式如式Ⅱ所示：Pr载体蛋白。

5.根据权利要求4所述的快速检测辣椒素类物质的胶体金免疫层析试纸条，其特征在于：所述载体蛋白为牛血清白蛋白BSA、卵清白蛋白OVA或钥孔血蓝蛋白KLH。

6.根据权利要求1所述的快速检测辣椒素类物质的胶体金免疫层析试纸条，其特征在于：所述检测垫检测线上每厘米所需要的辣椒素类物质包被抗原的包被量为0.125～0.6μg；质控线上每厘米所需要的兔抗鼠多克隆抗体的包被量为0.1～0.6μg。

7.根据权利要求1所述的快速检测辣椒素类物质的胶体金免疫层析试纸条，其特征在于：所述金标垫中所用的纳米金的粒径为15～20nm；所述金标垫上每厘米喷涂长度所需的纳米金标记的抗辣椒素类物质通用单克隆抗体的用量为400～980ng。

8.权利要求1所述的快速检测辣椒素类物质的胶体金免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)吸水垫的制备

将吸水纸剪裁即得吸水垫；

(2)检测垫的制备

检测线的包被：将辣椒素类物质包被抗原配制成浓度为0.2～1.2mg/mL的包被液，于距硝酸纤维素膜上沿8～15mm的位置，用线喷方式将其横向包被于硝酸纤维素膜上，得到检测线，每厘米检测线所需辣椒素类物质包被抗原的包被量为0.125～0.6μg，然后于37℃条件下干燥30～60分钟；

质控线的包被：将兔抗鼠多克隆抗体配成浓度为0.15～1.2mg/mL的包被液，于距检测线5～10mm的位置，用线喷方式将其横向包被于硝酸纤维素膜上，得质控线，每厘米质控线所需的兔抗鼠多克隆抗体的包被量为0.1～0.6μg，然后于37℃条件下干燥30～60分钟；

(3)样品垫的制备

将玻璃纤维膜放入封闭液中浸湿，取出，于37～40℃条件下干燥6～12小时，得样品垫，然后置干燥器中室温保存；

(4)金标垫的制备

将玻璃纤维膜放入封闭液中浸湿，取出，于37～40℃条件下干燥6～12小时，于已干燥的玻璃纤维膜上，用点喷方式向已干燥的玻璃纤维膜上横向喷涂纳米金标记的抗辣椒素类物质通用单克隆抗体溶液，每厘米喷涂长度所需的纳米金标记的抗辣椒素类物质通用单克隆抗体的用量为400～980ng，然后真空冷冻干燥2～6小时，置干燥器中室温保存；所述抗辣椒素类物质通用单克隆抗体由保藏编号为CCTCC NO.C201534的杂交瘤细胞株YQQD8分泌产生；

(5)试纸条的组装

在纸板的一面从上到下依次粘贴吸水垫、检测垫、金标垫和样品垫，相邻各垫在连接处交叠连接，交叠长度为1～3mm，即得快速检测辣椒素类物质的胶体金免疫层析试纸条。