[发明专利]一种牙鲆原始生殖细胞dead end基因及其的应用

说明书

本发明涉及牙鲆Dead end序列，具体的说是一种牙鲆原始生殖细胞dead end基因及其的应用。牙鲆Dead end基因为SEQ ID No.1中所示。所述基于牙鲆Dead end基因的siRNA为20‑50bp的siRNA。本发明在牙鲆中获得Dead end(Dnd)的序列，并以该序列为靶基因合成的siRNA有促进生长的作用，因而该序列及相关的siRNA在鱼类包括海水鱼类促进生长的应用中具有极大的价值，这为鱼类包括海水鱼类促生长相关研究提供了基础技术保证。同时，本发明基因序列为牙鲆特有的序列，可以促进牙鲆等海水鱼生长。

技术领域

本发明涉及牙鲆Dead end序列，具体的说是一种牙鲆原始生殖细胞dead end基因及其的应用。

背景技术

牙鲆，俗称牙片，为鲆鲽鱼类，录属于鲽形目、牙鲆科、牙鲆属，是我国和日韩等国的重要海水养殖鱼类。牙鲆的快速生长能够提高养殖效率，并减少长时间养殖过程中的各种风险。通过遗传育种技术获得快速生长的品系需要较长的时间。如何利用小分子物质促进其生长未见报道。

Dead end(Dnd)是脊椎动物特有的生殖质成分,是原始生殖细胞(PGCs)及性腺生殖细胞的标记基因，其参与了PGCs的发生、发育、迁移、存活等功能，对PGCs的发育及其脊椎动物的配子生成至关重要。它编码RNA结合蛋白，该蛋白含有6个保守的结构域，一个C端结构域，一个RRM(RNA Recognize Motif),四个N端结构域。至今为止尚未见其对生长的影响的报道。

RNA干扰技术是近些年来发展起来的一种阻抑基因表达的方法，可以特异性剔除或关闭特定基因的表达，该技术已被广泛用于探索基因功能以及表达调控等方面。该技术通过人为地引入与靶基因具有同源序列的dsRNA，宿主细胞对这些dsRNA迅即产生反应，其胞质中的核酸内切酶Dicer将dsRNA切割成多个具有特定长度和结构的小片段RNA(大约21～23bp)，即siRNA，最终诱导靶基因的mRNA降解，从而达到阻抑基因的表达，进而出现基因的功能缺失。

发明内容

本发明在于提供一种牙鲆原始生殖细胞dead end基因及其的应用。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种牙鲆原始生殖细胞dead end基因，牙鲆Dead end基因为SEQ ID No.1中所示。

一种基于牙鲆原始生殖细胞dead end基因的siRNA，所述基于牙鲆Dead end基因的siRNA为20-50bp的siRNA。

所述siRNA的Sense(5'-3')序列为：CCACCUGAGGGUUCUGCGUG；Antisense(5'-3')序列为：CACGCAGAACCCUCAGGUGG；

或，以上述siRNA序列为核心序列在5'端和/或3'添加不同碱基或者其它核苷酸类似物等获得。

一种基于牙鲆原始生殖细胞dead end基因的靶基因应用，所述根据SEQ ID No.1中所示的核苷酸序列的20-50bp siRNA靶基因在促生长中的应用。

所述根据SEQ ID No.1中所示的核苷酸序列的20-50bp siRNA靶基因在鱼类中促生长中的应用。

所述鱼类为牙鲆。

本发明的优点：

本发明是首次在牙鲆中发现Dead end(Dnd)的序列，并证实以该序列为靶基因合成的siRNA有促进生长的作用，因而该序列及相关的siRNA在鱼类包括海水鱼类促进生长的应用中具有极大的价值，这为鱼类包括海水鱼类促生长相关研究提供了基础技术保证。

同时，本发明基因序列为牙鲆特有的序列，可以促进牙鲆等海水鱼生长。

附图说明