[发明专利]一种人胎盘部位滋养细胞肿瘤细胞系

权利要求书

1.一种人胎盘部位滋养细胞肿瘤细胞系，其特征在于，所述的细胞系为人胎盘部位滋养细胞肿瘤细胞系，命名为PSTT-1，于2015年6月30日由中国普通微生物菌种保藏管理中心（CGMCC）保藏，保藏号为NO.10882。

2.按权利要求1所述的人胎盘部位滋养细胞肿瘤细胞系，其特征在于，所述的细胞系具有以下生物学特征：

单层贴壁生长，失去接触抑制，形态不均一，呈多突起的星形或纺锤形扁平状结构；体外培养生长良好，每5天传代一次，能够连续稳定传代30余代；染色体核型分析结果为正常女性核型：46，XX；PSTT-1与肿瘤组织STR分析结果高度相似，PSTT-1免疫细胞化学染色与肿瘤组织免疫组织化学染色结果一致。

3.按权利要求1所述的人胎盘部位滋养细胞肿瘤细胞系，其特征在于，所述的细胞系通过下述方法制备，采用离体的肿瘤组织经处理后传代培养，建成人胎盘部位滋养细胞肿瘤细胞系PSTT-1，包括以下步骤：

（1）取材：获得离体的新鲜的胎盘部位滋养细胞肿瘤切除标本，病灶组织浸入无菌Hanks溶液清洗，并去除结缔组织和坏死组织；

（2）原代培养：将肿瘤组织块接种于T25培养瓶瓶壁，静置培养，约3周后细胞从组织块长出；

（3）细胞纯化 ：接种约7周后传第1代，用0.25%胰蛋白酶消化，将细胞悬液接种于培养皿中，于倒置相差显微镜下观察，见部分细胞贴壁，将细胞悬液倒入另一培养瓶中继续培养；按上述方法，重复3次传代，使肿瘤细胞与成纤维细胞完全分开；

（4）传代培养：当细胞布满瓶底时，吸除培养液，PBS缓冲液漂洗，0.25%胰蛋白酶消化，按1:3的比例传代30余代；

（5）生物学特性鉴定，获得人胎盘部位滋养细胞肿瘤细胞系PSTT-1，保藏号为NO.10882。

4.按权利要求3所述的人胎盘部位滋养细胞肿瘤细胞系，其特征在于，所述制备方法中，采用体外培养条件为：含10%FBS、1%丙酮酸钠、1%L-谷氨酰胺、1%HEPES、1%双抗的RPMI1640细胞培养基，培养温度为37℃，气体环境为5%CO₂/95%空气，湿度为饱和湿度。

5.权利要求1所述的人胎盘部位滋养细胞肿瘤细胞系在用于制备胎盘部位滋养细胞肿瘤疾病的病因学、转移机制、耐药机理及临床干预研究模型中的用途。