[发明专利]枸杞子的新用途有效
申请号: | 201610080731.0 | 申请日: | 2016-02-03 |
公开(公告)号: | CN107034175B | 公开(公告)日: | 2021-07-02 |
发明(设计)人: | 陆华;高小平;姚奏英;刘志斌;刘芊辰 | 申请(专利权)人: | 成都中医药大学 |
主分类号: | C12N5/075 | 分类号: | C12N5/075;C12N5/0735 |
代理公司: | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人: | 李高峡;张娟 |
地址: | 611130 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 枸杞子 用途 | ||
1.枸杞子在制备人胚胎干细胞定向分化为类卵细胞的诱导液中的用途;该人胚胎干细胞为人胚胎干细胞H9,购买于中科院上海干细胞库,中国科学院干细胞库编号:SCSP-302;
所述诱导液的制备方法为:以细胞培养基为基础培养液,添加有终浓度为3%(v/v)的含药血清;所述含药血清按照如下方法制备:
(1)取枸杞子,粉碎,以5.0g/kg的剂量施用于鼠,施用方式为口服给药;
(2)给药30min、60min、90min后,眼底静脉丛取血,分别静置、离心得上清液,混匀,即为含药血清;所述离心转速为3000rpm,离心时间为10min;
所述细胞培养基的制备方法如下:取体积比为1:1的DMEM/ F-12培养基,加入1/4倍体积的血清替代品,混匀,再加入bFGF和非必须氨基酸,即得,其中,bFGF的终浓度为4 ng/mL,非必须氨基酸的终浓度为1%(v/v)。
2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于:步骤(2)中,静置的时间为2h。
3.人胚胎干细胞定向分化为类卵细胞的诱导液,其特征在于:它以细胞培养基为基础培养液,添加有终浓度为3%(v/v)的含药血清;所述含药血清按照如下方法制备:
(1)取枸杞子,粉碎,以5.0g/kg的剂量施用于鼠,施用方式为口服给药;
(2)给药30min、60min、90min后,眼底静脉丛取血,分别静置、离心得上清液,混匀,即为含药血清;所述离心转速为3000rpm,离心时间为10min;
所述细胞培养基的制备方法如下:取体积比为1:1的DMEM/ F-12培养基,加入1/4倍体积的血清替代品,混匀,再加入bFGF和非必须氨基酸,即得,其中,bFGF的终浓度为4 ng/mL,非必须氨基酸的终浓度为1%(v/v)。
4.根据权利要求3所述的诱导液,其特征在于:步骤(2)中,静置的时间为2h。
5.一种人胚胎干细胞定向分化为类卵细胞的方法,其特征在于:包括如下步骤 :
a、取人胚胎干细胞;该人胚胎干细胞为人胚胎干细胞H9,购买于中科院上海干细胞库,中国科学院干细胞库编号:SCSP-302;
b、置于权利要求3~4任意一项所述的诱导液中培养,培养时间不低于5天,即得类卵细胞。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:步骤b中,所述培养时间为5~7天。
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