[发明专利]一种药物组合物的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物检测领域，具体涉及一种药物组合物的检测方法。

背景技术

贯叶金丝桃已经有2400年的使用历史，近年来对贯叶金丝桃的研究热点放在抗抑郁功效方面含有多种具生物活性的化学成分，其中主要是苯并二蒽酮类化合物、金丝桃素和伪金丝桃素；多种芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素、间苯三酚类化合物等；其中以芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素为主要化合物。现代药理证明，芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素等均对在小鼠FST中均表现出明显的抗抑郁活性，是贯叶金丝桃抗抑郁症的主要活性成分。

舒肝解郁胶囊是由贯叶金丝桃和刺五加为原料，采用现代制药工艺制备而成的中成药，具有疏肝解郁、健脾安神的功效，临床常用于轻、中度抑郁症属肝郁脾虚证者，症见情绪低落、兴趣下迟滞、入睡困难、早醒、多梦、紧张不安、急躁易怒、食少纳呆、胸闷、疲乏无力、多汗、疼痛、舌苔白或腻，脉弦或细。由于舒肝解郁胶囊同时包含了贯叶金丝桃和刺五加两种药材的多种化学成分，包括：金丝桃苷、芦丁、槲皮素、槲皮苷、异槲皮苷、刺五加苷E、紫丁香苷及异嗪皮啶等，在定性和定量检测中常常互相干扰，同时由于贯叶金丝桃提取物中主要活性物质金丝桃苷、芦丁、异槲皮苷、槲皮素母核结构相同、性质相似，要利用HPLC方法准确将目标物质同其他杂质有效分离并且定量分析存在较大难度，成方制剂的质量控制更为困难。

《中国药典(2015版)》和韩林等所介绍的高效液相色谱检测方法[金丝桃苷含量的RP-HPLC法测定，时珍国医国药2012年第23卷第10期]均无法检测出槲皮素；例如钱秋霞等所报道的方法[钱秋霞等，HPLC法测定不同干燥方法的贯叶连翘中黄酮类化合物的含量，中草药,2001，32,5]其分离度达不到分离要求(分离度一般要求大于1.5)，其主要物质峰中还包含大量杂质。因此，建立一种简单、有效、灵敏度高的多成分高效液相色谱检测方法，对于贯叶金丝桃及含有贯叶金丝桃的成方制剂的质量控制和检测来说具有十分重要的意义。

发明内容

本发明解决的技术问题之一是针对含有贯叶金丝桃的药物组合物，如何快速、有效且能准确的检测有效成分，从而更好的控制药物组合物质量，为了解决上述技术问题，本发明提供了下述技术方案：

本发明一方面提供一种药物组合物检测方法，该方法包括以下步骤：取适量药物组合物制备成供试品溶液，利用液相色谱法对其进行检测，其中所述液相色谱的色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相A为乙腈，流动相B为0.1％磷酸溶液，检测波长为360nm，采用梯度洗脱；其中所述药物组合物为含有贯叶金丝桃提取物的药物组合物。

本发明提供的药物组合物的检测方法，其所述的梯度洗脱条件优选为：

本发明提供的药物组合物的检测方法，其中所述液相色谱检测条件中，柱温优选为30-35℃，更优选为30℃；流速优选为0.8-1.2ml/min，更优选为1.0ml/min。

本发明提供的药物组合物的检测方法，其中所述供试品溶液的制备方法优选为，取适量药物组合物，用含醇溶液溶解，提取，过滤，即得；其中所述含醇溶液为含有60％或以上的甲醇或乙醇的溶液；更优选为60％乙醇溶液；所述提取方法优选为超声提取。

上述供试品溶液的制备方法优选含有如下步骤：取药物组合物适量，研细，称取约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，密塞，精密加入60％乙醇25ml，称定重量，超声提取，放冷，再称定重量，用60％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

上述含贯叶金丝桃的药物组合物中活性成分优选为贯叶金丝桃和刺五加制备而成；更优选为舒肝解郁胶囊。

本发明所使用的色谱柱为常规的以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，如C18(2)5um 250x 4.6mm、SHI MaDzu VP-ODS(250×4.6mm,5μm)、AgilentC18(250×4.6mm,5μm)、Phenomenex Luna C18(250×4.6mm,5μm)、Phenomenex Luna C18(150×4.6mm,5μm)等；以规格为250×4.6mm,5μm效果更优。

本发明通过考察二极管阵列检测器(DAD检测器检测)检测含有贯叶金丝桃提取物的药物组合物(如舒肝解郁胶囊内容物)时，获知吸收波长在254nm、300nm和360nm附近均出现吸收峰值，其中检测波长为254nm时，梯度基线漂移大；检测波长为300nm时，各目标物质峰的吸收度较小；检测波长为360nm时，背景以及其它杂峰干扰小，且出峰结果稳定，检测效果最佳。