[发明专利]B2M在作为卵巢癌治疗靶点中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及分子生物学技术领域，具体地说，涉及B2M在作为卵巢癌治 疗靶点中的应用。

背景技术

卵巢癌是女性生殖器官常见的恶性肿瘤之一，发病率仅次于子宫颈癌和子 宫体癌而列居第三位。其病因不明确，可能与以下几个方面有关：癌症发病外 部因素(包括化学、物理、生物等致癌因子)，癌症发病内部因素(包括免疫 功能、内分泌、遗传、精神因素等)，以及饮食营养失调和不良生活习惯等。 多发生于围绝经期的妇女。35岁以上者多发卵巢上皮性癌，而青年及幼年女性 多为生殖细胞类恶性肿瘤。

Βeta-2-微球蛋白(B2M,beta-2-microglobulin)是主要组织相容性复合体 MHCI类分子的轻链，它与重链(α-chain)以非共价键连接，位于几乎所有有 核细胞的细胞膜上。另外，它还有游离形式，可以与膜上B2M相互转换。游 离型B2M在多种肿瘤中被检测到，包括乳腺癌、结直肠癌、胃癌、肺癌、口 腔癌、前列腺癌和睾丸癌，并且与肿瘤细胞的免疫逃逸和肿瘤的免疫治疗相关。

siRNA，即小干扰RNA(SmallinterferingRNA)，有时也称短干扰RNA(Short interferingRNA)或沉默RNA(SilencingRNA)，是一段长度为20-25个核苷酸的 双链RNA分子。它主要通过与特定基因的mRNA碱基形成特异性结合并使之降 解，从而抑制该基因的表达(GeneKnock-down)。近年来，由于siRNA以其在极 低浓度下特异性的高效作用，它已经成为在哺乳动物细胞中抑制特定基因表达 的有力工具，也越来越多地应用于哺乳动物神经系统基因功能的研究。

目前B2M在卵巢癌中的相关研究非常少，也没有B2M抑制肿瘤细胞迁移、侵 袭的报道，同时尚未见使用siRNA高效抑制B2M表达而显著抑制卵巢癌细胞增殖 等能力的报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供B2M在作为卵巢癌治疗靶 点中的应用。

在本发明的第一方面，提供了B2M基因或蛋白的抑制剂在制备治疗卵巢 癌的药物中的应用。

所述的抑制剂选自以B2M蛋白或其转录本为靶序列、且能够抑制B2M蛋 白表达或基因转录的小干扰RNA、dsRNA、shRNA、微小RNA、反义核酸； 或能表达或形成所述小干扰RNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸的构建物。

作为本发明的一个优选例，所述的抑制剂是序列如SEQIDNO.3和SEQID NO.4所示的siRNA。

在本发明的第二方面，提供了B2M基因或蛋白的抑制剂在制备抑制卵巢 癌细胞株增殖、迁移或侵袭的试剂中的应用。

作为本发明的一个优选例，所述的卵巢癌细胞株为OVCAR-3或SK-OV-3。

所述的抑制剂选自以B2M蛋白或其转录本为靶序列、且能够抑制B2M蛋 白表达或基因转录的小干扰RNA、dsRNA、shRNA、微小RNA、反义核酸； 或能表达或形成所述小干扰RNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸的构建物。

作为本发明的一个优选例，所述的抑制剂是序列如SEQIDNO.3和SEQID NO.4所示的siRNA。

在本发明的第三方面，提供了一种治疗卵巢癌的siRNA分子，所述的 siRNA分子序列如SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示。

本发明优点在于：

1、本发明发现敲低B2M后可显著抑制卵巢癌细胞株的增殖、迁移和侵袭， 表明针对卵巢癌B2M高表达的病人给予降低B2M的处理存在潜在的治疗效 果，证实了B2M是一种潜在的治疗卵巢癌的新型靶点，具有很大的临床应用 价值。

2、本发明设计了可显著敲低B2M表达的siRNA分子，取得了预料不到 的技术效果。

附图说明

图1.siRNA的敲除效果检测。A.OVCAR-3中的敲除效果检测；B.SK-OV-3 中的敲除效果检测。

图2.B2M对卵巢癌细胞株增殖的影响。A和C：OVCAR-3；B和D： SK-OV-3。**P<0.01。

图3.B2M对卵巢癌细胞株迁移和侵袭能力的影响。A和B，细胞划痕实 验；C和D，Transwell侵袭实验。*P<0.05。

具体实施方式