[发明专利]基于螺旋状毛细管的细胞磁分选装置及细胞磁分选装置方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种基于螺旋状毛细管的细胞磁分 选装置及细胞磁分选装置方法。

背景技术

细胞磁分选技术是借助偶联在磁性微粒上抗体高特异性识别并标记目标细胞表面抗原，再利用磁场的力量筛选磁珠的方式，将未结合磁珠的细胞除去，得到纯化的目标细胞，是一种细胞分选和富集的常用技术。目前广泛应用的细胞磁分选产品主要有两种，一种是磁力分离架，代表产品如StemCell公司的EasySep^TMMagnet，这是一种定制的强力磁铁，通过将标记有磁珠的细胞悬液装在试管里贴合在磁铁表面，然后静止一段时间，与磁珠结合的细胞就会被吸附在磁铁的侧壁上，之后通过倾倒的方式或者利用移液器去除清液，留下来的就是需要分选的目标细胞。另一种是分选柱，代表产品如.Miltenyi公司的分选柱，分选柱是一类填充有不同规格的铁珠的塑料容器。铁珠在磁场中可以起到磁力扩大的作用，同时表面有亲水包被，不会损伤细胞。

分选柱为一次性产品，连续分选时需不停更换，成本太高。磁力分离架没 有寿命限制，但是每次分选也必须更换分选用试管，无法实现连续不间断分 选。因此，本领域迫切需要开发一种不需更换耗材，可以实现连续分选的细 胞分选技术，同时又满足分选时间短、效率高的要求。

发明内容

本发明的目的是提供一种基于螺旋状毛细管的细胞磁分选装置及细胞磁 分选装置方法，通过采用放置在环形磁铁中央的螺旋状毛细管，让所有细胞 和磁珠的悬浊液都处在环形磁铁磁性最强的管壁附近。然后通过调整液体流 过毛细管的流速，可以实现细胞的连续分选。

为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种基于螺旋状毛 细管的细胞磁分选装置，包括螺旋状毛细管和环状磁铁，螺旋状毛细管放置 在环形磁铁中央，并紧贴环状磁铁的内壁，环形磁铁的磁力线方向在圆孔内 沿垂直于轴线的方向分布，螺旋状毛细管有两个端口，为加液口和排液口。

所述加液口和排液口位于环状磁铁的同侧。

所述的基于螺旋状毛细管的细胞磁分选装置的细胞磁分选方法，包括如 下步骤：

S1：样品放入：将包含有目标细胞、标记磁珠和杂散细胞的混浊液从螺 旋状毛细管的加液口加入，使其充满螺旋状毛细管；

S2：静止分离：将加液口和排液口关闭，并保持一段时间，使被磁珠标记 的目标细胞在磁场的作用下被牢固的吸附在毛细管的管壁上；

S3：慢流速清洗：从加液口加入清洗液，使其缓慢流过毛细管，将未被磁 珠标记的杂散细胞从排液口排出；

S4：快流速收集：从加液口加入缓冲液，使其快速流过毛细管，将被磁珠 标记的目标细胞从管壁冲刷下来，从排液口排出，并进行收集。

所述步骤S2中保持一段时间是指2分钟。

所述步骤S3中缓慢流过是指流速为1mm/s。

所述步骤S4中快速流过是指流速为50mm/s。

本发明的有益效果是：

本发明通过采用放置在环形磁铁中央的螺旋状毛细管，让所有细胞和磁 珠的悬浊液都处在环形磁铁的管壁附近。由于环形磁铁中央处磁场强度很弱， 管壁处磁场强度最高，采用这种装置，可以充分利用磁场，提高分选效率， 减少分选时间。S4步骤结束后，螺旋状毛细管内充满缓冲液，可以继续进行 S1样品放入步骤，开始下一个分选流程，从而实现细胞的连续分选，适用于 需要分选细胞数量较多的场合。

附图说明

图1是本发明细胞磁力分选装置的结构示意图。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细说明，以分离 CD3+细胞为例：

如图1所示，本发明基于的细胞磁力分选装置包括：螺旋状毛细管3和 环状磁铁4。螺旋状毛细管3管径外径1.5mm，内径1.12mm，螺旋状外圈直 径17.8mm。有两个端口，为加液口1和排液口2。所述加液口和排液口位于 环状磁铁的上侧。环形磁铁的材质为汝铁硼，大小为内径18mm、外径55mm、 高度60mm。环形磁铁的磁力线方向在圆孔内沿垂直于轴线的方向分布，越靠 近内壁表面的地方，磁场强度越大。螺旋状毛细管3放置在环形磁铁4的中 央，并紧贴环状磁铁的内壁。可以充分利用磁场，提高分选效率，减少分选 时间。

本发明的细胞磁分选方法，包括以下步骤：