[发明专利]抗羊痘病毒K3L蛋白C末端的单克隆抗体及其应用

说明书

本发明公开一株可分泌抗羊痘病毒K3L蛋白C末端的单克隆抗体的杂交瘤细胞株、其分泌的抗羊痘病毒K3L全蛋白的单克隆抗体，以及该杂交瘤细胞株和抗体的应用。本发明的可分泌抗羊痘病毒K3L蛋白C末端单克隆抗体的杂交瘤细胞株K3L35在中国典型培养物保藏中心保藏编号为：CCTCC NO：C2015223。由所述的K3L35杂交瘤细胞株可分泌K3L蛋白C末端单克隆抗体。本发明的K3L35杂交瘤细胞株及所分泌的单克隆抗体可在制备诊断或检测羊痘病毒感染试剂中的应用，也可在制备试验用试剂中的应用。

技术领域

本发明涉及一株单克隆抗体及应用，确切讲涉及一种可分泌抗羊痘病毒K3L蛋白C末端的单克隆抗体的杂交瘤细胞株、其分泌的抗羊痘病毒K3L蛋白的C末端单克隆抗体，以及该杂交瘤细胞株和抗体的应用。

背景技术

羊痘是羊疫病中一种高度接触性和具有毁灭性病毒病，被世界动物卫生组织（OIE）列为法定报告的动物疫病，以发热、结膜炎、鼻炎、皮肤和粘膜的痘疮、呼吸困难及死亡为特征。羊痘主要流行于非洲、中东、印度、尼泊尔土耳其的一些地区，国内主要流行于青海、甘肃、湖南和内蒙等地区。羊痘病毒（Sheeppox virus, SPV）属于痘病毒科、脊索动物痘病毒亚科、山羊痘病毒属，主要通过气溶胶、近距离接触或昆虫叮咬传播，绵羊是绵羊痘病毒主要的宿主，各年龄段均能感染，但是死亡病例主要发生于羔羊，死亡率高达100%，给养羊业造成重大的经济损失，被认为是经济上潜在的生物武器。因此，绵羊痘的诊断和防控一直是研究的热点。

中国发明专利2011103869424公开了一种羊痘病毒属病毒，包括山羊痘病毒、绵羊痘病毒及牛疙瘩皮肤病病毒的芯片检测装置。该专利通过设计特异性探针，可对羊痘病毒属的山羊痘病毒、绵羊痘病毒及牛疙瘩皮肤病病毒进行同时鉴定。本发明旨在建立一种灵敏度高、特异性强、节时省力并且易于观察结果的微阵列芯片检测羊痘病毒属山羊痘病毒、绵羊痘病毒及牛疙瘩皮肤病病毒的方法。

中国发明专利申请2013105940610和201310594930X分别公开了用于羊痘病毒胶体金检测试剂条的胶体金、金标抗体及其制备方法。所述胶体金中采用羊痘病毒P32单克隆抗体的最适宜标记量，所制备金标抗体复合物在可见光范围内进行扫描出现最大的吸收峰。

上述这些方法都是针对病毒复制中、后期的核酸或者结构蛋白而建立起来的，因此，它们只能在病毒感染宿主12h甚至更长的时间之后才能检测出病毒是否存在。而本发明所制备的抗K3L蛋白的C末端单克隆抗体在羊痘病毒早期感染检测中的应用，最早可在病毒感染细胞2小时检测到K3L的表达，24小时达到最大。因此，本发明涉及到的K3L抗体的制备可在羊痘病毒早期检测试剂或试剂盒中的应用。

发明内容

本发明提供一种可分泌抗羊痘病毒K3L蛋白C末端单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其分泌的抗羊痘病毒K3L蛋白的单克隆抗体，同时提供其用途。

本发明的可分泌抗羊痘病毒K3L蛋白C末端单克隆抗体的杂交瘤细胞株K3L35已经于2015年12月17日在中国武汉市武汉大学的中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为：CCTCC NO：C2015223。

由所述的K3L35杂交瘤细胞株可分泌K3L蛋白C末端单克隆抗体。

本发明的K3L35杂交瘤细胞株及所分泌的单克隆抗体可在制备诊断或检测羊痘病毒感染试剂中的应用，也可在制备试验用试剂中的应用。

本发明的抗K3L蛋白C末端的单克隆抗体制备方法如下：