[发明专利]香柏总多糖及其在制备免疫抑制药物中的用途

说明书

本发明属中药领域，涉及一种香柏总多糖，该多糖为从藏药徐巴原植物香柏（Sabina pingii var.wilsonii）枝叶中提取制备的水溶性粗多糖，本发明对其糖含量、糖醛酸含量、蛋白含量、分子量分布、单糖组成等结构特征进行了表征；经活性测定，结果表明所述的香柏多糖具有明显的抗补体作用，对补体激活经典途径的半数有效抑制浓度达到23～35μg/ml，与阳性对照药物肝素钠活性相当；同时可显著抑制LPS刺激下小鼠腹腔巨噬细胞分泌NO的水平，表明其具有很好的抗炎作用；本发明的香柏总多糖可用于制备抗补体、抗炎等免疫抑制相关药物。

技术领域

本发明属中药领域，涉及一种植物多糖及其药物用途，具体涉及一种从香柏（Sabina pingii var. wilsonii）中提取制备的总多糖及其在制备抗补体、抗炎药物中的用途。

背景技术

现有技术公开了补体系统的正常激活在消灭外来微生物、清除肌体内损伤或死亡的细胞和组织、维持机体的平衡中起着重要的作用。然而该系统的非正常激活会引起人体免疫系统的过度反应，造成人体自身正常组织的损伤，参与类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、急性呼吸窘迫综合征等多种疾病的病理过程。目前临床上广泛使用的糖皮质激素、环磷酰胺、甲胺蝶吟等免疫抑制剂虽然对某些与补体过度激活相关的疾病有一定治疗作用，但由于该类药物并非专一的补体抑制剂，选择性差，长期应用会降低机体的防御机能，导致抗感染能力下降，易继发感染和使潜在病灶扩散，产生多种并发症和副作用。因此临床上急需高效、低毒、专一的新型补体抑制剂。

天然多糖是中草药的主要活性成分类群，如人参多糖、灵芝多糖、茯苓多糖、枸杞多糖等，常被报道具有免疫增强、抗肿瘤、降血糖等重要活性，越来越引起天然药物或保健食品领域研究人员的重视。而部分清热类中药多糖，如鱼腥草多糖、紫草多糖等则表现出明显的抗补体、抗炎活性，在防治与补体过度激活相关的急性肺损伤等重症炎性疾病方面表现出良好的疗效（ZL201010022880.4, ZL201110284642.5）。

香柏（Sabina pingii var. wilsonii）是藏药“徐巴”的原植物之一，主要分布在湖北西北部、陕西南部、甘肃南部、四川、云南及西藏等省区海拔2600-4900米高山地带，以枝叶入药，具有清热、祛湿、解毒等功效，用于治疗肺炎、风湿性关节炎、类风湿性关节炎等疾病。文献报道香柏中含有挥发油、黄酮、苯丙素、甾体等成分，但迄今尚未见对其多糖的活性研究报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种水溶性植物总多糖及其在制备免疫抑制药物中的用途。尤其是香柏总多糖及其在制备抗补体、抗炎药物中的用途。

本发明所述的香柏总多糖是从藏药徐巴原植物香柏（Sabina pingii var.wilsonii）枝叶中提取制备的一种水溶性粗多糖，通过以下步骤制得：将香柏枝叶粉碎、用乙醇除脂，进行水提，水提液浓缩后醇沉，沉淀复溶后冷冻干燥。

本发明制得的香柏总多糖具有以下结构特征：

分子量分布：小于25000 Da；单糖组成：以阿拉伯糖、半乳糖醛酸、半乳糖、葡萄糖为主，并含有少量鼠李糖、甘露糖、葡萄糖醛酸；糖含量大于55%，糖醛酸含量大于8%，蛋白含量小于2%。

本发明中采用体外细胞溶血法测定，结果显示，所述的香柏总多糖具有明显的抑制补体过度激活作用，测定的三批批香柏总多糖的IC₅₀值为23μg/ml～35μg/ml，与阳性对照药肝素钠（27.81μg/ml）活性相当；

本发明中采用巨噬细胞分泌NO法测定，结果显示，所述的香柏总多糖能显著抑制LPS诱导的腹腔巨噬细胞NO分泌，具有较强的抗炎效果；