[发明专利]绿及咳喘片在制备抑制白血病细胞K562细胞增殖药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于中药技术领域，具体涉及一种绿及咳喘片在制备抑制白血病细胞K562细胞增殖药物中的应用及绿及咳喘片的制备方法。

背景技术

绿及咳喘颗粒标准号WS-10616（ZD-0616）-2002，记载于国家中成药标准汇编内科肺系（二）分册。由小绿芨200g、鸡矢藤200g、功劳木100g、通关藤100g、白及100g、虎杖100g、透骨草100g、黄精100g作为原料药制成，具有养阴润肺、清热解毒、化瘀止血的功效，用于热燥犯肺引起的咳嗽，潮热，盗汗等症。

现有技术中，尚未有绿及咳喘片在在制备抑制人白血病细胞K562细胞增殖药物中的应用的报道，也未见有绿及咳喘片提取制备方面采用超临界萃取的报道，而传统水煎煮、乙醇回流提取的方法，工艺粗糙、落后，杂质多，导致患者用量过大，不方便服用，严重影响了本品在临床上应用。

发明内容

发明目的：本发明的目的在于提供一种绿及咳喘片在制备抑制白血病细胞K562细胞增殖药物中的应用。

本发明的另一个目的在于提供一种绿及咳喘片的制备方法。

本发明的目的是通过如下的方案实现的：

绿及咳喘片在制备抑制白血病细胞K562细胞增殖药物中的应用，所述绿及咳喘片由小绿芨200g、鸡矢藤200g、功劳木100g、通关藤100g、白及100g、虎杖100g、透骨草100g、黄精100g作为原料药制成，所述绿及咳喘片的制备方法包括如下步骤：取小绿芨200g、鸡矢藤200g、功劳木100g、通关藤100g、白及100g、虎杖100g、透骨草100g、黄精100g，加入到CO₂超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4-6%，萃取压力15-30MPa，温度30-50℃，CO₂流量l-3ml/g生药·min，萃取时间700-800min，得超临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成200片，每片重0.50g。

优选的，上述的绿及咳喘片在制备抑制白血病细胞K562细胞增殖药物中的应用，所述绿及咳喘片的制备方法包括如下步骤：取小绿芨200g、鸡矢藤200g、功劳木100g、通关藤100g、白及100g、虎杖100g、透骨草100g、黄精100g，加入到CO₂超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%，萃取压力25MPa，温度40℃，CO₂流量2ml/g生药·min，萃取时间750min，得超临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成200片，每片重0.50g。

现有技术中，绿及咳喘颗粒口服，一次10g，一日3-4次。绿及咳喘颗粒服药量大。采用本发明方法制备成的绿及咳喘片每片重0.50g，每次仅需2片，一日服用3-4次。在具有更多活性成分的条件下大大减少了服用量。此结论可以通过下述试验证明。

试验一、不同方法制备的绿及咳喘片中大黄素含量的比较

l、仪器及试药本发明绿及咳喘片：按实施例1方法制备，使用1000g原料药，经提取制成200片，每片重0.50g。原绿及咳喘颗粒，按照WS-10616（ZD-0616）-2002标准方法制备。Agilent1200高效液相色谱仪；METTLERAE240电子分析天平；大黄素对照品（中国药品生物制品检定所）。

2、方法

照高效液相色谱法（中国药典2015年版第四部凡例十五）测定。

色谱条件及系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.1%磷酸溶液（80∶20）为流动相；检测波长为437nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于4000。

对照品溶液的制备精密称取大黄素对照品适量，加甲醇制成每1ml含10μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取本发明绿及咳喘片10片，研细，混匀，取0.1g，精密称定，加水20ml使溶解，加盐酸2ml，摇匀，加热回流30分钟，冷却，加氯仿30ml，超声处理10分钟，转入分液漏斗中，分取氯仿液，水液再用氯仿振摇提取2次，每次15ml，合并氯仿液，在80℃水浴上蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，取滤液，即得。