[发明专利]在蛋白质纯化过程中降低样品中的一种或多种杂质的水平的方法

权利要求书

1.降低含有所关注的抗体和一种或多种杂质的样品中的所述一种或多种杂质的水平的方法，所述方法包括以下步骤：

(i)使所述含有所述抗体和一种或多种杂质的样品与含有亲和介质的色谱柱接触；

(ii)得到所述样品的第一洗出液；

(iii)使来自(ii)中的所述第一洗出液以流通模式与活性碳接触，从而除去所述一种或多种杂质；

(iv)得到所述样品的第二洗出液；

(v)使所述第二洗出液与阴离子交换多孔介质膜吸附剂接触；以及

(vi)得到所述样品的第三洗出液，

其中相对于所述方法中未使用所述活性碳时所述一种或多种杂质的水平，所述第三洗出液含有较低水平的所述一种或多种杂质，

其中所述一种或多种杂质为蛋白质杂质和/或DNA杂质。

2.权利要求1的方法，其还包括对来自步骤(vi)的所述第三洗出液进行病毒过滤。

3.权利要求1的方法，其中所述方法使用单个制动器。

4.权利要求1的方法，其中步骤(ii)中的所述洗出液在与所述活性碳接触前经过病毒灭活。

5.权利要求1的方法，其中所述抗体是单克隆抗体或多克隆抗体。

6.权利要求1的方法，其中所述活性碳包括活性炭。

7.权利要求1的方法，其中将所述活性碳填充入柱、密封的一次性装置、筒或囊中。

8.权利要求1的方法，其中将所述活性碳浸入多孔材料中。

9.权利要求8的方法，其中所述多孔材料容纳在柱、密封的一次性装置、筒或囊中。

10.用于从蛋白A洗出液中纯化抗体的流通方法，其包括下述步骤：

(i)使回收自蛋白A色谱柱的所述洗出液与活性碳接触，从而除去一种或多种杂质；

(ii)使来自步骤(i)的流通样品与阴离子交换色谱介质接触；

(iii)使来自步骤(ii)的流通样品与阳离子交换色谱介质接触；以及

(iv)得到来自步骤(iii)的包含所述抗体的流通样品，

其中所述洗出液连续流经步骤(i)-(iii)，并且其中步骤(iii)之后的所述流通样品中的一种或多种杂质的水平低于其在步骤(i)中所述洗出液中的水平，

其中所述一种或多种杂质为蛋白质杂质和/或DNA杂质。

11.权利要求10的流通方法，其还包括对来自步骤(iii)的所述流通样品进行病毒过滤。

12.权利要求10的流通方法，其还包括在步骤(ii)和步骤(iii)之间使用在线静态混合器和/或缓冲罐来改变pH。

13.权利要求10的流通方法，其中所述方法使用单个制动器。

14.权利要求10的流通方法，其中来自所述蛋白A色谱柱的所述洗出液在与活性碳接触前经过病毒灭活。

15.权利要求10的方法，其中所述抗体是单克隆抗体或多克隆抗体。

16.权利要求10的方法，其中所述活性碳包括活性炭。

17.权利要求10的方法，其中将所述阴离子交换色谱介质和/或所述阳离子交换色谱介质填充入柱。

18.权利要求10的方法，其中所述阴离子交换色谱介质包括阴离子交换树脂。

19.权利要求10的方法，其中所述阳离子交换色谱介质包括阳离子交换树脂。