[发明专利]一种螺旋接种方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种菌落计数技术领域，特别是涉及一种螺旋接种方法。

背景技术

螺旋接种菌落计数方法是一种新的食品，化妆品以及研究用样品中微生物的快速定量方法。这种螺旋接种菌落计数方法创建于1976年，由Donnelly,C.B.,J.E.Gilchrist等人最先提出，经过20多年的实际应用，国外微生物学界已经普遍认可，并列为国际分析化学家协会(AOAC)的方法，已被美国食品药品监督管理局(FDA)收录为国家标准。

发明内容

本发明提供一种螺旋接种方法，使其应用于微生物计数、诱变分析、药敏分析和单菌落分离，能够为实验室节约耗材、降低成本，更重要的是节省精力和时间，结果较传统平板法更精确、重复性更好。

为了解决上述问题，本发明提供一种螺旋接种方法，其中，包括以下步骤：

S10、样品依据阿基米德螺旋为接种轨迹，以一递减的比率接种样品；

S20、通过旋转凸轮和转板，可使液体达到对数式或其它方式接种；

S30、接种后，菌落分布在螺旋轨迹上，并随半径的增加分布得越来越分散；

S40、利用按接种法则进行计数的栅格，自平板外周向中央对平皿上的菌落进行计数；

S50、计算后得到样本中微生物的浓度。

优选的，所述菌落就是指在一定条件下，如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间，每克或者每毫升检样所生长出来的细菌菌落总数。

优选的，所述螺旋接种方法包括指数模式，指数模式是指在接种过程中，样品量以指数模式递减，在旋转平板方法中用于菌落计数及单菌落分离，其中原始菌液浓度范围：4.0×10²-4.0×10⁵Cfu/ml。

优选的，所述螺旋接种方法包括慢指数模式，慢指数模式是指在接种过程中，样品量以指数模式递减，在旋转平板方法中用于菌落计数及单菌落分离，速度稍慢，使用湿的平板时，选择缓慢指数模式，防止样品在向心力的作用下外溅，其中原始菌液浓度范围：4.0×10²-4.0×10⁵Cfu/ml。

优选的，所述螺旋接种方法包括比例模式，在比例模式中，接种量与到中心的直线距离成比例递减，接种物浓度的范围较窄，有助于放大细菌数量在很小的梯度范围内对抗生素或诱变剂的反应。

优选的，所述螺旋接种方法包括均一模式，均一模式是指在旋转过程中，样品以恒定的速率接种。

优选的，所述螺旋接种方法包括草坪模式，草坪模式是指按照均一模式以恒定速率接种，但轨迹比均一模式密一倍，会在整个平板上产生均一、密集的生长。

优选的，所述螺旋接种方法包括循环模式，循环模式是指模拟指数模式，但接种轨迹不是一条螺旋线，而是一系列圆圈，每组圆圈的接种浓度相同。

与现有技术相比，本发明具有以下优点：

本发明是一种快速、精确、均匀的接种方法，主要用于微生物计数、诱变分析、药敏分析和单菌落分离，能够为实验室节约耗材、降低成本，更重要的是节省精力和时间，结果较传统平板法更精确、重复性更好。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，下面对本发明作进一步详细说明，但所举实例不作为对本发明的限定。

本发明的实施例包括一种螺旋接种方法，其中，包括以下步骤：

S10、样品依据阿基米德螺旋为接种轨迹，以一递减的比率接种样品；

S20、通过旋转凸轮和转板，可使液体达到对数式或其它方式接种；

S30、接种后，菌落分布在螺旋轨迹上，并随半径的增加分布得越来越分散；

S40、利用按接种法则进行计数的栅格，自平板外周向中央对平皿上的菌落进行计数；

S50、计算后得到样本中微生物的浓度。

菌落就是指在一定条件下，如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间，每克或者每毫升检样所生长出来的细菌菌落总数。

本实施例中，螺旋接种法包括以下模式：

指数模式(接种量：50μl)：

在接种过程中，样品量以指数模式递减。在旋转平板方法中用于菌落计数及单菌落分离。原始菌液浓度范围：4.0×10²-4.0×10⁵Cfu/ml