[发明专利]磷酯酰肌醇蛋白聚糖3检测试剂盒在审
申请号: | 201610092184.8 | 申请日: | 2016-01-29 |
公开(公告)号: | CN105759039A | 公开(公告)日: | 2016-07-13 |
发明(设计)人: | 钱承玉;钱琛;吕作文;刘壮;马瑞灵 | 申请(专利权)人: | 山东康力医疗器械科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/574 | 分类号: | G01N33/574 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 277100 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 磷酯酰肌醇 蛋白 聚糖 检测 试剂盒 | ||
1.一种磷酯酰肌醇蛋白聚糖3检测试剂盒,其特征在于:包括试剂R1、试剂R2,试剂R1包括缓冲液、稳定剂、电解质、表面活性剂和防腐剂;试剂R2包括用抗磷酯酰肌醇蛋白聚糖3抗体致敏的聚苯乙烯胶乳颗粒、缓冲液、稳定剂、表面活性剂和防腐剂;该试剂盒还包括磷酯酰肌醇蛋白聚糖3蛋白校准品。
2.根据权利要求1所述的磷酯酰肌醇蛋白聚糖3检测试剂盒,其特征在于:所述试剂R2的制备步骤包括:
(1)聚苯乙烯胶乳颗粒的激活:在带有羧基的聚苯乙烯胶乳颗粒中加入乙基二甲基胺丙基碳化二亚胺,混合均匀,反应结束后加入己二酸二酰肼,继续反应,得到激活的聚苯乙烯胶乳颗粒;
(2)抗磷酯酰肌醇蛋白聚糖3抗体的氧化:用高碘酸钠将抗磷酯酰肌醇蛋白聚糖3抗体Fc端糖链上的羟基氧化成醛基;
(3)抗磷酯酰肌醇蛋白聚糖3抗体与聚苯乙烯胶乳颗粒的偶联:将步骤(1)激活的聚苯乙烯胶乳颗粒和步骤(2)氧化的抗磷酯酰肌醇蛋白聚糖3抗体混合进行反应,反应结束后,加入葡萄糖封闭聚苯乙烯胶乳颗粒上没有发生反应的集团,获得偶联抗磷酯酰肌醇蛋白聚糖3抗体的聚苯乙烯胶乳颗粒。
3.根据权利要求1所述的磷酯酰肌醇蛋白聚糖3检测试剂盒,其特征在于:所述的试剂R1和试剂R2中的缓冲液为PBS缓冲液、Tris缓冲液、甘氨酸缓冲液、硼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、柠檬酸-磷酸盐缓冲液、2-吗啉乙磺酸缓冲液、氯化铵缓冲液中的一种或者几种。
4.根据权利要求1所述的磷酯酰肌醇蛋白聚糖3检测试剂盒,其特征在于:所述试剂R1与试剂R2的体积比为4∶1。
5.根据权利要求1所述的磷酯酰肌醇蛋白聚糖3检测试剂盒,其特征在于:所述的聚苯乙烯胶乳颗粒的平均粒径为50-500nm。
6.根据权利要求4所述的磷酯酰肌醇蛋白聚糖3检测试剂盒,其特征在于:所述的聚苯乙烯胶乳颗粒的平均粒径为200-300nm。
7.根据权利要求1所述的磷酯酰肌醇蛋白聚糖3检测试剂盒,其特征在于:所述的抗磷酯酰肌醇蛋白聚糖3抗体为兔抗人多克隆抗体或者鼠抗人单克隆抗体。
8.根据权利要求1所述的磷酯酰肌醇蛋白聚糖3检测试剂盒,其特征在于:所述磷酯酰肌醇蛋白聚糖3蛋白校准品中的磷酯酰肌醇蛋白聚糖3蛋白的含量为0-800ng/ml。
9.根据权利要求2所述的磷酯酰肌醇蛋白聚糖3检测试剂盒,其特征在于:所述步骤(1)中乙基二甲基胺丙基碳化二亚胺∶聚苯乙烯胶乳颗粒=0.1-1∶100;己二酸二酰肼∶聚苯乙烯胶乳颗粒=10-50∶100;步骤(2)中高碘酸钠∶抗磷酯酰肌醇蛋白聚糖3抗体=1∶2;步骤(3)中抗磷酯酰肌醇蛋白聚糖3抗体∶激活的聚苯乙烯胶乳颗粒=5-20∶100,葡萄糖∶激活的聚苯乙烯胶乳颗粒=20-50∶100,所述比例均为质量比。
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