[发明专利]一种薏苡内生真菌及其应用

权利要求书

1.一种薏苡内生真菌，其特征在于，它的命名为香柱菌属E.bromicola，保 藏登记号为CGMCCNo.11410。

2.根据权利要求1所述的薏苡内生真菌，其特征在于，所述薏苡内生真菌显 微形态为：在显微镜下可观察到大量成熟的分生孢子，分生孢子椭圆形或肾形， 单个顶生，分生孢子及孢子梗无色透明，孢子梗顶端变尖，基部无隔膜；所述 薏苡内生真菌在PDA培养基上25℃培养，3周后，得到细小的白色菌落，菌落 直径10-20mm，菌落正面白色，棉质，质地紧密，边缘平整，中央隆起或稍有 皱褶，背面黄色至深褐色，从中央到周围颜色逐渐变浅。

3.根据权利要求1所述的薏苡内生真菌，其特征在于，所述薏苡内生真菌的 tef1基因序列如SEQIDNO.1所示，所述薏苡内生真菌的tub2基因序列如SEQID NO.2所示。

4.根据权利要求1所述的薏苡内生真菌，其特征在于，

(1)所述薏苡内生真菌与薏苡共培养的特征：内生真菌固体菌种培养基： 麦麸250g，棉籽壳250g，葡萄糖20g，KH₂PO₄3g，MgSO₄·7H₂O1.5g，1L 去离子水；内生真菌与薏苡共培养盆栽土基质：腐殖土：蛙石＝3：l；每日光照 培养16h，光照度2000Ix，温度25±1℃；薏苡内生真菌与薏苡组培苗共培养120 d后收获植株，测定薏苡组培苗的各项生长指标，包括株高、鲜重和干重，结果 表明，在同样生长条件及采收后处理条件下，和对照组相比，薏苡内生真菌处 理组的薏苡组培苗的各项生长指标均具有显著性差异，处理组的株高是对照组 的108.89％，全株的鲜重和干重分别达到对照组的118.71％和166.55％；

(2)所述薏苡内生真菌与拟南芥共培养特征：培养基1/2MS，光照培养 9-15d，每日光照16h，光照度2000Ix，温度25±1℃；培养第9d拟南芥有大 量须根出现；培养第10d，须根迅速增多且叶片变大，薏苡内生真菌处理组的 侧根数是对照组的10.30倍；培养第15d，须根伸长、加粗，叶片肥大变绿，开 花；此时薏苡内生真菌处理组的主根长是对照组的83.14％，处理组的叶片数、 苗高、鲜重和开花率分别是对照组的1.14、4.29、1.55和5.25倍。

5.根据权利要求1所述的薏苡内生真菌，其特征在于：所述薏苡内生真菌分 离纯化方法如下：

(1)冲洗采集到的新鲜薏苡叶、茎、种仁，除去表面的泥土和灰尘后，用去 离子水洗3次；

(2)按以下程序进行表面消毒：75％乙醇浸泡30s；1％次氯酸钠浸泡5min； 75％乙醇浸泡30s；无菌去离子水洗3次；

(3)吸干残留水分，将叶、茎切成0.5cm×0.5cm的组织块，种仁切成0.1cm ×0.1cm的组织块，

(4)分别从3个部位中各随机挑取8个组织块，每4个组织块为一组放在加 有青霉素(50mg/L)的PDA培养基的培养皿中。培养皿用封口膜(Pechiney, Chicago,IL)密封后，于26±2℃培养7-14d，待菌落从组织块周围长出后，挑取 菌丝尖端转移到新的PDA培养基上纯化培养，并按形态合并，既得。

6.一种菌剂，它的活性成分为权利要求1-4任一所述的薏苡内生真菌。

7.权利要求1-4任一所述薏苡内生真菌在促进拟南芥或薏苡生长中的应用。