[发明专利]一种人源化抗白介素22基因工程抗体及其应用

说明书

本发明涉及生物技术领域，更具体地，本发明公开了一种人源化抗IL‑22基因工程抗体、其制备方法及应用。通过运用基因工程技术以及噬菌体表面展示技术，直接从人抗体基因库中筛选能与人IL‑22结合的抗体，获得抗体基因并表达。该抗体可用于Th17/IL‑17相关自身免疫性疾病的治疗及IL‑22的检测。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，具体涉及一种人源化抗白介素22（interleukin-22，IL-22）基因工程抗体的制备方法以及在Th17/IL-17相关自身免疫性疾病中的用途。

背景技术

Th17细胞是近年来新发现的T细胞亚群，主要分泌IL-17A，IL-17F，IL-21 和IL-22。Th17细胞的主要作用是参与宿主防御真菌及细菌，但是许多研究发现Th17/IL-17在许多自身免疫性疾病如银屑病，红斑狼疮，多发性硬化症，炎症性肠病等疾病以及肿瘤的发生发展中发挥十分重要的作用¹。

Th17/IL-17的主要功能是对抗细菌以及真菌的感染，但是在激活宿主防御的过程中，经常伴有炎症细胞浸润为主的局部炎症反应，以及活性氧的产生，因而不可避免的产生组织损伤。特别是在各种因素导致的慢性炎症过程中，Th17招募的中性粒以及巨噬细胞等骨髓起源的细胞常常会造成严重的局部组织损伤甚至自身免疫疾病的发生。通过运用各种Th17/IL-17相关基因敲除小鼠的研究证实了Th17/IL-17对于众多的自身免疫性疾病银屑病，红斑狼疮，多发性硬化症，炎症性肠病等疾病的发生发展中发挥十分重要的作用¹。EliLilly，Novartis等众多制药公司研发了许多针对Th17/IL-17的抗体和药物，针对众多的自身免疫性疾病开展了临床试验。其中针对IL-17以及IL-17受体的人源化单克隆抗体在治疗银屑病以及银屑病性关节炎方面取得了较好的疗效。现在抗IL-17的抗体治疗银屑病已进入III期临床实验。从临床实验的结果来看，尽管针对IL-17的抗体具有非常好的效果，但还有20%左右的患者对IL-17中和不产生任何反应，40%左右的患者反应较差²。针对IL-17受体的抗体用于治疗银屑病性关节炎也进入临床II期实验，从结果上来看，尽管也有一定的疗效，但也有高达50%左右的患者对治疗不起任何反应³。针对IL-17的中和抗体治疗在多发性硬化症，关节炎以及炎症性肠病方面的临床实验结果不是很好，提示可能具有更加复杂的机制参与这些疾病中。

白介素22 (IL-22) 属于IL-10家族细胞因子，其主要由Th17，γδ T细胞，NKT细胞以及最新鉴定的ILC细胞分泌。IL-22在众多的组织中均有表达，如肠，肺，肝脏，肾脏，胸腺，胰岛和皮肤等。IL-22的主要生理学功能是促进细胞增殖，再生以及宿主防御。但是近些年的研究发现IL-22在众多自身免疫性疾病中发挥十分重要的作用，如银屑病，特应性皮炎，关节炎，红斑狼疮，炎症性肠病等。通过基因敲除IL-22小鼠以及中和IL-22研究发现，IL-22可以作为银屑病、特应性皮炎以及炎症性肠病的治疗靶点。

Act1是IL-17信号通路最重要的接头分子，对于IL-17信号转导具有至关重要的作用。近年来，研究发现Act1的单核苷酸多态性与许多自身免疫性疾病密切相关，如银屑病、炎症性肠病、红斑狼疮等。我们的一个研究发现Act1的一个单核苷酸多态性导致银屑病的分子机制，并且运用小鼠模型证明在Act1缺失/突变造成的皮肤炎症中IL-22扮演十分重要的角色。由此，发现抗IL-22抗体能够改善Act1缺失/突变造成的皮肤炎症，提示抗IL-22抗体可以作为抗IL-17抗体的补充治疗方法来应用（见说明书附图1和图2）⁴。我们和临床合作的一个课题发现，对抗IL-17抗体治疗不反应的这部分银屑病病人中，Act1的突变率非常高。因此，对于抗IL-17抗体不反应的这一部分病人，可以采取抗IL-22抗体治疗，应该会有很好的效果，考虑到Th17/IL-17参与众多自身免疫性疾病，抗IL-22抗体可以作为抗IL-17抗体治疗的补充治疗方法，具有十分广泛的治疗和应用前景。