[发明专利]一种无菌蚕虫草菌种的接种系统及接种方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种虫草培育技术领域，特别涉及一种无菌蚕虫草菌种的接种系统及接种方法。

背景技术

现有技术中，在虫草的培育过程中，在接种时，因整个环境不是完全封闭的，从而导致在接种过程中，菌种与外界环境相接触，导致杂菌的产生，不利于虫草的生长。而目前，在专利号为201120081412.4的一种封闭式发酵罐接种系统中，提出了在盛种钢瓶与发酵罐之间增加一封闭连接单元，以确保将盛种钢瓶中的菌种导入发酵罐内的整个过程中，处于一封闭的环境，有效地防止了在倒菌种的过程中，原始菌种与外界环境相接触。但是在将发酵罐内的菌种接种至接种瓶内的这一过程中，通常仍是采用将发酵罐内的菌种倒至接种喷壶中，而后通过接种喷壶将菌种喷施到接种瓶内，再进行接种。在此过程中，通常需要将接种瓶内的封口掀开，将喷壶的喷嘴伸入接种瓶内进行接种。此方法，不仅造成了接种时，菌种与外界环境相接触，导致在虫草的培育过程中产生杂菌；同时采用喷壶在喷施过程中，喷施速度慢，耗费人工。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种无菌蚕虫草菌种的接种系统，该接种系统确保了发酵罐内的菌种在接种过程中处于一封闭的系统，有效地杜绝了菌种与空气的接触，杜绝了杂菌的产生。

为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：一种无菌蚕虫草菌种的接种系统，包括发酵罐、带封口的接种瓶，所述接种系统还包括设于所述发酵罐与所述接种瓶间的接种装置、设置在所述发酵罐上的空气过滤器，通过所述空气过滤器将空气过滤后向所述发酵罐内吹氧，所述接种装置的入口端通过连接管连接在所述发酵罐的出口端上，所述接种装置的出口端上还连接有接种软管，所述接种软管的另一端上还连接有可穿过所述接种瓶上的封口、将菌种喷施到所述接种瓶内的喷施件。

优选地，所述接种装置为抽吸泵。

优选地，所述的喷施件为注射针头。

本发明的另一个目的是提供一种无菌蚕虫草菌种的接种方法，所述接种过程在上述接种系统中进行，具体步骤如下：

1）在发酵罐内加入50kg营养液，在0.10~0.12Mpa、120~125℃条件下进行灭菌，灭菌后，降低发酵罐内温度至19~22℃；

2）将待接种的母种稀释7~8倍后，取稀释液800~1000ml倒入所述发酵罐中，反应2~3天；

3）在22~23℃条件下，通过所述发酵罐上的空气过滤器向所述发酵罐内吹氧，使得母种在所述发酵罐内长菌丝；

4）经48~72小时后，通过所述接种装置将菌丝接种至所述接种瓶内；

其中，步骤1）中的营养液的配制方法如下：1L水中加入玉米粉250~350g、葡萄糖15~25g、柠檬酸三胺0.9~1.2g、硫酸镁0.9~1.2g、维生素B₁25~50mg、维生素B₁₂25~50mg。

优选地，步骤2）中的所述母种是通过如下步骤制得的：

a）制备培养基：将200~250g土豆、8~15g蚕蛹粉加入1000ml水中，烧开30~50min，过滤去渣，补水至1000ml，加入葡萄糖20~25g、柠檬酸三胺0.8~1.1g、硫酸镁0.8~1g、磷酸二氢钾2.5~3.5g、维生素B₁30~40mg、维生素B₁₂30~40mg、亚硒酸钠盐0.8~1g、琼脂15~20g，微火熔化，调节pH6.5~7.5间；

b）将配置好的培养基趁热加入空白试管中，试管口用牛皮纸或无纺布包扎，进行高压灭菌，将灭菌后的试管在55~65℃时取出，倾斜放置、自然冷却成为斜面；

c）将野生虫草菌种接种至斜面上，接种后在常温下生长15~20天后，转色即可用于生产。

进一步优选地，步骤a）所制备的培养基的pH值在6.5~7.0间。