[发明专利]一种鲨鱼鱼肉高F值寡肽

说明书

技术领域

本发明涉及一种动物高F值寡肽，具体涉及一种鲨鱼鱼肉高F值寡肽。

背景技术

高F值寡肽混合物是一个由由3～7个氨基酸残氨基酸残基所组成的混合小肽（或称寡肽）体系。F值（Fischerratio）是指支链氨基酸（BCAA：Val，Ile，Leu）与芳香族氨基酸（AAA：Trp，Tyr，Phe）含量的摩尔数比值。正常人的血液中F值为3.0-3.5，而患有肝脏疾病病人的F值只有1.0或者更低，而高F值寡肽的F值应大于20，远高于人体中这两类氨基酸的比值。由于它具有独特的氨基酸组成和生理功能，已经受到食品和医药界的高度关注。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种鲨鱼鱼肉高F值寡肽。

本发明为解决上述技术问题所采取的技术方案为：一种鲨鱼鱼肉高F值寡肽，其特征在于该高F值寡肽的蛋白含量为95.1～96.4%，氨基酸总量为83.7～85.4%，支链氨基酸的含量为16.8～17.1%，芳香族氨基酸的含量为0.43～0.48%，F值为35.2～39.6，分子量为630～720Da，支链氨基酸中Val：Ile：Leu为1：1～1.5：3～4，芳香族氨基酸中Trp：Tyr：Phe为1：1～1.2：1～1.5。

该鲨鱼鱼肉高F值寡肽的制备方法为：

1）鲨鱼鱼肉醇溶蛋白的制备：取鲨鱼鱼肉按1g:15mL～1g:20mL固液比加入90%～95%的乙醇溶液，用高速组织捣碎机将其制成匀浆，在25～30℃、功率650～700W超声提取150min~180min；将提取液的pH值用1mol/LNaOH调至9.5～10.0，用蒸馏水将乙醇浓度调至55%～65%，室温静置45min～60min，于8000～10000rpm离心10min～15min；取上清液，并加入NaCl至浓度为5%～8%，静置8h～10h后，于8000～10000rpm离心10～15min，收集沉淀，冻干，即得鲨鱼鱼肉醇溶蛋白。

）鲨鱼鱼肉醇溶蛋白的酶解：取鲨鱼鱼肉醇溶蛋白，按固液比1g:5mL～1g:10mL，加入甘氨酸—氢氧化钠缓冲液（0.05mol/L，pH9.5），用0.1mol/LHCl或0.1mol/LNaOH调节pH到9.0～1.0，得混合液；将混合物温度调制55～65℃，按照醇溶蛋白质量的0.5%～1.0%加入碱性蛋白酶（酶活力1.95×10⁵），酶解时间3h～4h后，酶解液于90～95℃保温10～15min，灭酶活；将酶解液温度调至50～60℃，按照醇溶蛋白质量的0.6%～0.8%加入木瓜蛋白酶，酶解时间4h～5h，酶解液降至室温，于8000～10000rpm离心10～15min，取上清液。

）鲨鱼鱼肉高F值寡肽的酶解：将上述上清液依次经超滤、活性碳吸附纯化和大孔树脂精制，得鲨鱼鱼肉高F值寡肽。

作为优选，所述的步骤1）中的鲨鱼为灰星鲨（Mustelusgriseus）。

作为优选，所述步骤3）的超滤、活性碳吸附纯化和大孔树脂精制的具体过程为：

超滤：将上述酶解上清液于0.1～0.15MPa的工作压力和20～30℃的工作温度下采用采用3kDa超滤膜进行超滤处理，收集分子量小于3kDa部分，得超滤酶解液；

活性碳吸附纯化制：将超滤酶解液调pH值至2.5~3.5，按照物料与活性炭颗粒比为10～15:1将超滤酶解液以0.3～0.5mL/min流速缓慢加入到活性炭颗粒装载于玻璃柱中，上样完成后，采用2～3柱体积的1：1比例的1mol/L氨水和无水乙醇混合溶液洗脱色谱柱，收集洗脱液，干燥，得活性肽精制多肽

大孔树脂精制：将活性碳精制多肽配成10～20mg/mL的溶液，调pH值至6.5～7.5，缓慢加入到物料与AB-8大孔树脂比为10～15:1的玻璃柱中，用2～3倍柱体积的双蒸水洗脱除去杂质，再用2～3柱体积的95%乙醇洗脱，收集95%乙醇洗脱物，喷雾干燥，即为鲨鱼鱼肉高F值寡肽。

经测定，所得鲨鱼鱼肉高F值寡肽的蛋白含量为95.1～96.4%，氨基酸总量为83.7～85.4%，支链氨基酸的含量为16.8～17.1%，芳香族氨基酸的含量为0.43～0.48%，F值为35.2～39.6，分子量为630～720Da，支链氨基酸中Val：Ile：Leu为1：1～1.5：3～4，芳香族氨基酸中Trp：Tyr：Phe为1：1～1.2：1～1.5。