[发明专利]一种禽流感病毒、禽腺病毒二联灭活疫苗

说明书

本发明提供一种禽流感病毒、禽腺病毒二联灭活疫苗，本发明的疫苗所使用的H9亚型禽流感病毒QDY株和I群4型禽腺病毒YBAV‑4株新毒株的TCID₅₀/EID₅₀效价高、免疫原性好并能抵御H9亚型及禽腺病毒病各地方分离毒的攻击。本发明制备的疫苗的安全性良好，未出现由疫苗引起的任何局部和全身不良反应。保存期试验中经过性状、安全性试验、效力试验数据的分析，结果与同类产品的单苗相比较，二联苗无明显差异，均稳定有效；效力试验结果证明，二联苗和二种单苗抗体均保持高水平，比同类产品产生抗体快，而对照组抗体为阴性。

技术领域

本发明属于兽用生物制品技术领域，具体涉及一种禽流感病毒、禽腺病毒二联灭活疫苗。

背景技术

禽流感是由A型流感病毒引起的、主要流行于动物和人类中的一种传染性、死亡率高的急性、高度传染性疾病，广泛发生于世界各地，并且经常变异，对人类和养禽业危害很大。

通过对Ⅰ群禽腺病毒的流行病学调查，该病在我国鸡群中发病率较高，可通过水平和垂直两种途径传播，且呈逐年上升趋势。发病的宿主范围也越来越广，白羽肉鸡、肉种鸡、蛋鸡、黄羽鸡均可感染发病，特别是2010年以后发病呈现增加趋势，在全国范围内均有流行。许多I群禽腺病毒可在健康禽体内复制，症状非常轻微或不表现感染症状，但是I群4型禽腺病毒例外，可直接引起鸡群发病，主要病变表现为心包积液和肝、肾肿大，本病于1963年首次在美国发生，随后在世界各地相继出现，是全世界家禽和野禽常见的传染病原。1976年我国台湾省首次发生本病，之后全国各地均有发生本病的报道，且呈逐年上升趋势，给鸡养殖业带来严重的危害。

近些年来，H9亚型禽流感是较为常见的严重威胁家禽的重要疾病；而鸡群对I群4型禽腺病毒的感染愈来愈多，此病很容易引起继发感染疫病，给禽业养殖户带来很多烦恼，而且多次使用疫苗尤其是灭活疫苗，不仅增加鸡场人力和物力负担，同时多次抓鸡的注射应激,还会影响生产性能，致使鸡群对疾病的易感性增大。加之近年来毒株的不断变异，使得虽然推出的多种选择的疫苗，但仍然出现控制不住疫情发展的局面，所以需要筛选获得新的流行毒株来应对变异所造成的新的危害。

发明内容

本发明的目的是提供一种禽流感病毒、禽腺病毒二联灭活疫苗，从而弥补现有技术的不足。

本发明的二联灭活疫苗，其中抗原为灭活的禽流感病毒和禽腺病毒；

其中禽流感病毒优选为H9亚型禽流感病毒QDY株，于2015年4月29日保藏在中国武汉，武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO:V201517。

禽腺病毒为I群4型禽腺病毒YBAV-4株，其保藏编号为CCTCCNo.V201541。

上述的灭活疫苗，其中病毒的灭活采用甲醛灭活；

本发明的灭活疫苗的制备方法如下：

1)油相制备：

取矿物油95份，硬脂酸铝1份，在油相制备罐中混合均匀并加热至80℃后，再加5份司本80(Span-80)，至温度达到115℃时维持40分钟，冷却后完成油相制备；

2)水相制备：

将灭活的禽流感病毒液、I群禽腺病毒毒液混合；取混合抗原液95份，灭菌的5份吐温80，充分混匀；

其中禽流感病毒液、I群禽腺病毒的数量比优选为1:2；

3)乳化

取油相2份放入乳化罐中，加入水相1份后，再以3500r/min搅拌30～40分钟完成乳化制备。