[发明专利]用于防治蓝莓毛色二胞枝枯病的解淀粉芽孢杆菌、菌剂及其制备方法

权利要求书

1.一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)菌株HMQAU140045，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCCNo.11768。

2.一种由权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)菌株HMQAU140045制备的菌剂。

3.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于，菌剂的活性成分为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)菌株HMQAU140045的菌体和/或发酵滤液。

4.权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)菌株HMQAU140045用于防治蓝莓毛色二胞枝枯病。

5.权利要求2或3所述的菌剂用于防治蓝莓毛色二胞枝枯病。

6.一种权利要求2或3所述的菌剂的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：

(1)将低温保存的HMQAU140045菌株在LB固体培养基上活化，挑取单菌落在LB斜面培养基上28℃培养24小时，获得活化的菌种；

(2)用无菌的接种环从LB斜面上刮取一环活化的菌种，接种于50mL LB液体培养基130rpm，30℃振荡24h，收集菌体，并调整菌体浓度为10⁸cfu/mL，获得种子液；

(3)发酵培养按体积比1.5％将步骤(2)得到的种子液接种于发酵培养基，于28℃，180r/min摇培84h；

摇培得到的发酵液离心后，菌体用无菌水洗涤两次，离心，刮取沉淀的菌体置于无菌水中，配制得到只含菌体的菌剂A；

摇培得到的发酵液于4℃，12000rpm离心20分钟获得上清液，通过0.22μm的滤器，即得到只含发酵滤液的菌剂B；

摇培得到的发酵液离心后，刮取沉淀的菌体置于发酵滤液中，得到包含菌体和发酵滤液的菌剂C。

7.根据权利要求6所述的菌剂的制备方法，其特征在于，

所述的LB固体培养基和LB斜面培养基的组成为：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠5g，琼脂粉15g，水1000mL，pH7.0；

所述的LB液体培养基的组成为：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠5g，水1000mL，pH7.0。

8.根据权利要求7所述的菌剂的制备方法，其特征在于，所述发酵培养基的组成为：玉米粉1.0-3.0％，酵母提取物0.5-1.5％，胰蛋白胨0.5-1.5％，磷酸氢二钾0.3-0.7％，pH7.0，余量为水。

9.根据权利要求1所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)菌株HMQAU140045，其特征在于，所述用于检测解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)菌株HMQAU140045的方法，是以待测菌株的基因组DNA为模版，以27f 5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’和1492r 5’-TACGGTTACCTTGTTACGACTT-3’为引物扩增16SrDNA，如果所得扩增产物为SEQ ID No:1所示的核苷酸序列，即为HMQAU140045菌株。