[发明专利]一种童康片的质量检测方法

权利要求书

1.一种童康片的质量检测方法，童康片的原材料组成为：黄芪80.5g、白术53.5g、防风27g、山药80.5g、陈皮6.5g、牡蛎80.5g，其特征在于，其质量检测方法包括性状、鉴别、检查、指纹图谱测定和含量测定，其中鉴别是采用薄层色谱法对童康片中的黄芪、白术、防风、陈皮进行鉴别，所述鉴别包括：

(1)薄层色谱法鉴别黄芪：取童康片适量，去糖衣，精密称取10g，加入适量硅藻土，研细，加入甲醇300mL，加热回流20min，过滤，滤液蒸干，残渣加水50mL使溶解，用二氯甲烷振摇萃取3次，每次50mL，弃去二氯甲烷溶液，水溶液用水饱和正丁醇振摇萃取3次，每次50mL，合并正丁醇液，用浓氨水洗涤3次，每次50mL，分取浓氨水液备用，正丁醇液蒸干，残渣加水10mL溶解，过D101型大孔树脂柱，以水100mL洗脱，弃去水液，再用40％乙醇80mL洗脱，弃去洗脱液，再以70％乙醇100mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1mL溶解，作为供试品溶液；另取黄芪对照药材粉末3g，加甲醇20mL，加热回流1h，蒸干，残渣加水30mL溶解，用水饱和正丁醇提取3次，每次20mL，合并正丁醇液，以1％氢氧化钠溶液洗涤2次，每次30mL，弃去碱洗液，正丁醇液再以正丁醇饱和水溶液50mL洗涤1次，弃去水溶液，正丁醇液蒸干，残渣以甲醇1mL溶解，作为黄芪对照药材溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成1mg/mL的对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液4μL、对照药材溶液4μL、对照品溶液8μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以11:8:3的氯仿-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开、取出、晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱、对照品色谱相应的位置上，日光下显相同的棕褐色斑点；波长为365nm的紫外灯下显相同的橙黄色荧光斑点；

(2)薄层色谱法鉴别陈皮：取(1)中备用的浓氨水液，加稀盐酸调pH值至2～3，用乙酸乙酯振摇提取3次，每次400mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇2mL溶解，作为供试品溶液；另取陈皮对照药材粉末0.3g，加甲醇10mL，加热回流20min，过滤，取滤液5mL，浓缩至2mL，作为对照药材溶液；另取陈皮苷对照品，加甲醇制成1mg/mL的对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液3μL、对照药材溶液1μL、对照品溶液7μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以100：17：10的乙酸乙酯-甲醇-水为展开剂，展开、取出、晾干，喷以5％三氯化铝乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置波长为365nm的紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(3)薄层色谱法鉴别防风：取童康片适量，除去糖衣，加适量硅藻土，研细，取10g，置磨口锥形瓶中，加丙酮200ml，超声处理20min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为童康片供试品溶液；另取防风对照药材粉末1g，置磨口锥形瓶中，加丙酮20ml，超声处理20min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；另取升麻素苷对照品、5-O-甲基维斯阿米醇苷对照，分别加甲醇制成1mg/ml的对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液20μl、对照药材溶液2μl、对照品溶液1μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以4:1的三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置波长为254nm的紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(4)薄层色谱法鉴别白术：取童康片适量，除去糖衣，加适量硅藻土，研细，置磨口锥形瓶中，加5:1的醋酸乙酯-无水乙醇混合溶液30mL，水浴加热回流1小时，放冷，过滤；滤液加活性炭0.2g，在水浴上搅拌5min，过滤，滤液蒸干；残渣加无水乙醇0.5mL溶解，作为供试品溶液；另取白术对照药材1g，方法同上制成对照药材溶液；照中药部颁标准规定的薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、对照药材溶液及阴性供试品溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9:1的甲苯-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以对二甲氨基苯甲醛溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置波长为365nm的紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

所述的含量测定为采用高效液相色谱法同时对童康片中的升麻素苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、橙皮苷进行含量测定，测定步骤如下：

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基键和硅胶为填充剂；流动相体系：乙腈-0.1％甲酸水溶液；流动相A为乙腈，流动相B为0.1％甲酸，按洗脱条件进行梯度洗脱，流速为1ml/min，柱温25℃，检测波长为200-400nm；理论板数按橙皮苷计算应不低于2000；其中，所述洗脱条件为：

对照品溶液的制备：精密称取升麻素苷标准品3.96mg、毛蕊异黄酮葡萄糖苷2.94mg、5-O-甲基维斯阿米醇苷3.25mg、橙皮苷9.19mg置25ml容量瓶中，加甲醇溶解、定容到刻度，作为储备液；从中吸取5ml到10ml量瓶中，加甲醇定容到刻度，作为对照品溶液1；从对照品溶液1中吸取1ml到2ml量瓶中，加甲醇定容到刻度，作为对照品溶液2；

供试品溶液的制备：取适量童康片，研细，取约4g，精密称定，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入20ml甲醇，称定重量，采用加热回流方式提取60min，提取1次，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液；

测定法：分别精密吸取对照品溶液1、对照品溶液2与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。