[发明专利]一种醋酸亮丙瑞林的制备方法

权利要求书

1.一种醋酸亮丙瑞林的制备方法，其特征是包括以下步骤：

1）固相树脂Boc-Pro-聚苯乙烯树脂置于反应瓶中，用无水CH₂Cl₂搅拌洗涤，抽干；经去 保护基、洗涤、中和、洗涤、抽干，然后按照亮丙瑞林多肽序列，依次接二肽、接三肽、直到接 完九肽，得到亮丙瑞林九肽树脂pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Leu-Leu-Arg-Pro-聚苯乙烯树 脂，最后经过裂解脱侧链保护，沉淀、过滤、析出固体，洗涤，抽干，真空干燥至恒重，得到亮 丙瑞林粗品；

2）亮丙瑞林粗品溶解在醋酸、乙腈、水溶液中，超声处理，经过滤膜过滤，取滤液待用；

3）利用高效液相色谱仪检测亮丙瑞林粗品纯度；利用质谱仪器确认亮丙瑞林粗品分子 量；

4）对过滤后的亮丙瑞林粗品进行粗纯，利用反相高效液相色谱系统，制备动态轴向压 缩柱，流动相A为质量百分浓度100%乙腈溶液，流动相B为质量百分浓度100%纯化水，进行等 度洗脱分离纯化；采用紫外检测器对样品进行检测，收集目的峰值的肽溶液；

5）对粗纯后的亮丙瑞林粗品进行分离纯化，利用反相高效液相色谱系统，制备动态轴 向压缩柱，流动相A为质量百分浓度100%乙腈溶液，流动相B为质量百分浓度0.1%-0.3%醋酸 水溶液，进行梯度洗脱分离纯化；采用紫外检测器对样品进行检测，分段收集目的峰值的肽 溶液。

6）将分离纯化后的高纯度高浓度目的肽溶液进行减压旋蒸浓缩，浓缩液收集待用；

7）将浓缩液经过反相动态轴向压缩柱采用离子交换法转成醋酸盐；

8）将转好醋酸盐合格产品进行减压旋蒸浓缩、冷冻干燥，得到白色絮状粉末产品，经检 测合格即为最终产品。

2.根据权利要求1所述的一种醋酸亮丙瑞林的制备方法，其特征是：制备动态轴向压缩 柱内装固定相为十八烷基硅烷键合硅胶的反相硅胶。

3.根据权利要求1所述的一种醋酸亮丙瑞林的制备方法，其特征是：步骤2）醋酸、乙腈、 水溶液配置时，体积比为醋酸∶乙腈∶水=1∶2∶40。

4.根据权利要求1所述的一种醋酸亮丙瑞林的制备方法，其特征是：步骤4）中的流动相 梯度选择0.01min到40minA∶B质量百分浓度为5%:95%等度洗脱。

5.根据权利要求1所述的一种醋酸亮丙瑞林的制备方法，其特征是：步骤5）中的流动相 梯度选择0.01min到40minA∶B质量百分浓度由22%:78%～28%:72%梯度洗脱。

6.根据权利要求1所述的一种醋酸亮丙瑞林的制备方法，其特征是：步骤7）将浓缩液经 过制备动态轴向压缩柱完成离子交换转成醋酸盐，所用到的流动相为30～50mmol醋酸铵缓 冲盐体系。