[发明专利]一种纯化戈那瑞林的方法在审
申请号: | 201610102107.6 | 申请日: | 2016-02-25 |
公开(公告)号: | CN105646671A | 公开(公告)日: | 2016-06-08 |
发明(设计)人: | 徐红岩;秦敬国 | 申请(专利权)人: | 吉尔生化(上海)有限公司;上海吉尔多肽有限公司 |
主分类号: | C07K7/23 | 分类号: | C07K7/23;C07K1/20 |
代理公司: | 上海浦东良风专利代理有限责任公司 31113 | 代理人: | 张劲风 |
地址: | 200241 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 纯化 方法 | ||
1.一种纯化戈那瑞林的方法,其特征在于包括以下步骤:
1)将戈那瑞林粗品先经SPE柱进行梯度洗脱纯化:先用体积百分比10%乙腈+体积百分 比0.1%三氟乙酸水溶液洗脱,然后用体积百分比40%乙腈+体积百分比0.1%三氟乙酸水溶液 洗脱,收集目的峰值的肽溶液;
2)将步骤1)中收集的目标肽溶液经反相高效液相色谱柱进行梯度洗脱纯化:流动相A 为体积百分比0.01-0.5%磷酸水溶液,流动相B为色谱级乙腈,梯度洗脱为B%:15%-55%,收集 目标峰的肽溶液;
3)将目标峰肽溶液利用HPLC转盐法转盐:流动相A为体积百分比0.05-0.3%醋酸水溶 液,流动相B为色谱级乙腈,梯度为5%的恒梯度冲洗10-25分钟,然后用醋酸水溶液和乙腈体 系洗脱,洗脱梯度为10%-70%,收集醋酸戈那瑞林肽溶液;
4)减压旋蒸上述肽溶液浓缩冷冻干燥得到醋酸戈那瑞林。
2.根据权利要求1所述的一种纯化戈那瑞林的方法,其特征在于:所述步骤1)中SPE柱 为HyperSepPEP或者MCXSPE柱。
3.根据权利要求1所述的一种纯化戈那瑞林的方法,其特征在于:所述步骤3)中色谱柱 固定相为十八烷基键合硅胶。
4.根据权利要求1所述的一种纯化戈那瑞林的方法,其特征在于:所述步骤3)流动相A 为体积百分比0.1%醋酸水溶液。
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