[发明专利]心血管疾病生物标记的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种生物检测方法，特别涉及一种生物标记的检测方法。

背景技术

通过检测病患血液中的肌钙蛋白(Troponin I)与排钠肽(NT-proBNP)等相关心血管疾病生物标记(cardiovascular disease biomarkers)的含量，可作为评估急性胸痛与心脏衰竭的指标。

目前常见的检测方法为酶联结免疫吸附分析法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)或电化学氧化还原法进行检测具有生物标记(biomarker)的配体液，需要先将蛋白质接上标签(labeling)，并且需要冲洗的过程，检测时间长且较不灵敏。以场效晶体管制做生物感测器，具有无须标记，不需冲洗以及灵敏度高的优点。然而，所欲量测的生物标记通常是处于高盐浓度环境(例如人体血液)中，为了避免该配体液的高盐浓度产生的屏蔽效应(screening effect)导致无法量测，通常会先稀释该配体液才以场效晶体管进行后续检测而容易造成检测误差且不方便。此外，以电化学氧化还原法进行量测时，其所使用的电化学感测器因缺乏增益效果，不易观察到细微的电信号，所以有时会施加较大的电压，导致键结于电化学感测器上的受体(receptor)被破坏而失去功能。

发明内容

本发明的目的在于提供一种生物标记的检测方法。

本发明的生物标记的检测方法，包含准备步骤及检测步骤。

该准备步骤包括准备生物感测晶体管，该生物感测晶体管包括基体及与 该基体彼此间隔设置的反应电极，该基体具有源极、与该源极间隔设置的漏极、及位于该源极与该漏极之间的栅极端，该反应电极具有相对该栅极端并与该栅极端间隔设置的电极本体、及设置于该电极本体表面且与该电极本体相互键结的受体。

该检测步骤包括将能与该受体(抗体(antibody)或适体(aptamer))产生反应并具有生物标记的配体液结合于该受体上，并施加可调制脉波宽度与高度的脉波电压于该反应电极，以令该反应电极与该栅极端之间产生压差，并于该脉波宽度内量测运算自该基体产生的检测电流，得到第一感测指标。

较佳地，该生物标记包括肌钙蛋白及排钠肽。

较佳地，该受体包括抗体及适体。

较佳地，该检测步骤的该脉波宽度不大于10^-3秒。

较佳地，还包含实施于该检测步骤后的转换步骤，将该检测电流相对该脉波宽度进行积分转换，得到第二感测指标。

较佳地，该检测步骤包括连续性地施加该脉波电压。

较佳地，该准备步骤中的该生物感测晶体管选自高速电子迁移率场效晶体管、硅基场效晶体管、纳米线场效晶体管、纳米碳管场效晶体管、石墨烯场效晶体管，或二硫化钼场效晶体管，该电极本体与该受体相互键结的表面是由金所构成。

较佳地，该反应电极与该基体的顶面，并与该栅极端位于同一个平面。

本发明的有益效果在于：该检测步骤是将能与该受体(抗体(antibody)或适体(aptamer))产生反应并具有生物标记的配体液结合于该受体上，并施加可调制脉波宽度与高度的脉波电压于该反应电极，以令该反应电极与该栅极端之间产生压差，并于该脉波宽度内量测运算自该基体产生的检测电流，得到第一感测指标。由此，本发明可以克服屏蔽效应，直接于高盐浓度下检测该配体液中的心血管疾病生物标记。

附图说明

图1是一俯视示意图，说明本发明生物感测晶体管的一实施例。

图2是一电流对时间的关系图，说明本发明一个反应电极有键结一排钠肽抗体于一缓冲液中量测而得的电流值。

图3是一电流对时间的关系图，说明本发明该反应电极有键结排钠肽抗体，对参考蛋白液、及具体例1～5于一脉冲宽度内所量测而得的电流值，具体例1～5分别表示不同的排钠肽浓度配制于参考蛋白液，参考蛋白液为BSA配制于缓冲液中而成。

图4是一电荷对时间的关系图，说明图3的电流对时间作积分的曲线图。

图5是一电荷变化值对排钠肽浓度的关系图，辅助说明图4所述具体例1～5的电荷变化值。

图6是一电流对时间的关系图，说明本发明该反应电极有无键结排钠肽抗体于一缓冲液中量测而得的电流值。

图7是一电流对时间的关系图，说明本发明该反应电极有键结排钠肽抗体于含有不同排钠肽浓度的人体血清中量测而得的电流值，具体例6～12分别表示不同的排钠肽浓度，于一脉冲宽度内所量测而得的电流值。