[发明专利]一种癌细胞或细菌的捕获方法及其试剂盒在审

专利信息
申请号: 201610104350.1 申请日: 2016-02-25
公开(公告)号: CN105524887A 公开(公告)日: 2016-04-27
发明(设计)人: 李亮亮 申请(专利权)人: 李亮亮
主分类号: C12N5/09 分类号: C12N5/09;C12N1/20;C12N1/02
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 451252 河南省郑*** 国省代码: 河南;41
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摘要:
搜索关键词: 一种 癌细胞 细菌 捕获 方法 及其 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种捕获癌细胞或细菌的方法,其特征在于,将NTA功能化载体与 含有靶标结合蛋白和Ni2+的样品共同孵育;所述靶标结合蛋白中包 括组氨酸标签和能够与癌细胞或细菌特异性结合的蛋白或抗体。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述Ni2+的浓度为80 μmol/L~220μmol/L。

3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述共同孵育后还 包括释放步骤,具体为捕获有癌细胞或细菌的NTA功能化载体与金属 离子螯合剂孵育。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述金属离子螯合剂的 浓度为80μmol/L~220μmol/L。

5.根据权利要求1~4任一项所述的方法,其特征在于,所述靶标结 合蛋白为带有组氨酸标签的转铁蛋白或带有组氨酸标签的伴刀豆蛋 白。

6.根据权利要求1~4任一项所述的方法,其特征在于,所述样品为 菌液、细胞悬液、血液或组织匀浆。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述样品为细胞悬液、 血液或组织匀浆,其中癌细胞的浓度为95个/mL~110个/mL;所述 样品为菌液、血液或组织匀浆,其中细菌的浓度为98CFU/mL~ 113CFU/mL。

8.根据权利要求1~4任一项所述的方法,其特征在于,所述NTA功 能化载体的制备方法包括:将羟基化的载体依次与3-氨丙基三乙氧 基硅烷、N,N’-琥珀酰亚胺基碳酸酯、N-(5-氨基-1-羧基戊基)亚胺 基乙酰乙酸孵育后制得NTA功能化载体。

9.一种癌细胞或细菌的捕获试剂盒,其特征在于,包括NTA功能化载 体、靶标结合蛋白、结合剂和释放剂;

所述靶标结合蛋白包括带有组氨酸标签的能够与癌细胞或细菌特异 性结合的蛋白或抗体;所述结合剂中包括Ni2+;所述释放剂中包括 金属离子螯合剂。

10.根据权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,所述靶标结合蛋白 为带有组氨酸标签的转铁蛋白或带有组氨酸标签的伴刀豆蛋白;所述 金属离子螯合剂为EDTA。

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