[发明专利]一种烟曲霉素的提取方法有效
申请号: | 201610104785.6 | 申请日: | 2016-02-25 |
公开(公告)号: | CN105622593B | 公开(公告)日: | 2018-06-26 |
发明(设计)人: | 薛晓锋;吴黎明;倪辉;曹葳蕤;杜冰;赵柳微;王妙;张中印 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院蜜蜂研究所 |
主分类号: | C07D407/04 | 分类号: | C07D407/04 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 郝瑞刚 |
地址: | 100093*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 烟曲霉素 树脂 乙醇水溶液洗脱 大孔树脂吸附 生产成本低 乙醇水溶液 资源利用率 传统工艺 绿色环保 溶剂萃取 生产过程 无水乙醇 层析柱 发酵液 洗脱液 粗提 反萃 吸附 清洗 浓缩 环境保护 安全 | ||
1.一种烟曲霉素的提取方法,包括步骤:
1)将烟曲霉素发酵液的pH值用盐酸、磷酸、硫酸中的一种调节为1~6.0,用弱极性或非极性大孔树脂吸附,所用大孔树脂的孔径为比表面积为100~1200m2/g,大孔树脂使用前用乙醇和水活化;所述大孔树脂的型号为D101,XAD-2,HP-20,SP825,SP850或SP700;
2)吸附后的树脂置于层析柱中,用质量浓度15~30%的乙醇水溶液清洗;
3)用无水乙醇或质量浓度50~98%的乙醇水溶液洗脱树脂,洗脱液经浓缩和干燥,得到烟曲霉素粗提品,无水乙醇或乙醇水溶液洗脱树脂在层析柱中进行,无水乙醇或乙醇水溶液的体积为床层体积的2~4倍。
2.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述步骤1)中,将烟曲霉素发酵液的pH值调节为1~6.0,加入大孔树脂,发酵液和大孔树脂的体积质量比为15~20mL:1g;搅拌后过滤,过滤得到的树脂用水清洗。
3.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述步骤1)中,将烟曲霉素发酵液离心,分离出上清液,将上清液的pH值调节为1~6.0,活化后的树脂置于层析柱中,上清液以0.5~3倍床层体积/小时的速度流过层析柱。
4.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述层析柱的高径比为1~10。
5.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述步骤2)中乙醇水溶液以0.5~3倍床层体积/小时的速度流过层析柱。
6.根据权利要求1~5任一所述的提取方法,其特征在于,还包括对烟曲霉素粗提品的通过复溶后,经重新装填的层析柱进行二次纯化:烟曲霉素粗提品按照质量体积比40~50mg:1~2L,用30%的乙醇水溶液溶解,再次经过装填有大孔树脂的层析柱用无水乙醇或乙醇水溶液洗脱,洗脱液经避光浓缩和干燥,得到晶体;
晶体按照质量体积比40~50mg:0.1~0.5mL溶于丙酮,加入烟曲霉素粗提品质量的0.5~1倍的环己胺,反应10~15min后冷却,过滤、挥干丙酮。
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