[发明专利]一种饲料添加剂中纽甜含量的高效液相色谱测定方法

权利要求书

1.一种饲料添加剂中纽甜含量的高效液相色谱测定方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）配制梯度浓度的纽甜标准溶液；

2）采用液相色谱法对步骤1）配制的纽甜标准溶液进行检测，计算得到纽甜出峰的峰面 积，以纽甜标准溶液的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线；其中，色谱条件为采 用C₁₈液相色谱柱，检测波长210nm，流动相为pH3.5~4.0的庚烷磺酸钠、三乙胺和乙腈的混 合水溶液，庚烷磺酸钠、三乙胺、乙腈和水的质量体积比为2.6~3.4g：3~4.5mL：300~450 mL：500~650mL；

3）将饲料添加剂加入水中，并进行超声处理，得到样品处理液；

4）将步骤3）得到的样品处理液在与步骤2）相同的液相色谱条件下进行检测，计算得到 纽甜出峰的峰面积，根据步骤2）建立的标准曲线计算出样品处理液中纽甜的浓度，并结合 所述样品处理液的体积和样品重量，计算出所述饲料添加剂中纽甜的含量。

2.根据权利要求1所述饲料添加剂中纽甜含量的高效液相色谱测定方法，其特征在于， 步骤1）中为配制浓度依次为0.1、0.2、0.3、0.4和0.5mg/mL的纽甜标准溶液。

3.根据权利要求1所述饲料添加剂中纽甜含量的高效液相色谱测定方法，其特征在于， 所述C₁₈液相色谱柱规格为250mm长×4.6mm内径，填料粒度为5μm。

4.根据权利要求1所述饲料添加剂中纽甜含量的高效液相色谱测定方法，其特征在于， 步骤2）所述流动相配制过程中先将庚烷磺酸钠溶于水中，再加入三乙胺混合均匀，用磷酸 调节溶液的pH为3.0~3.5后，加入乙腈并用磷酸调节溶液pH至3.5~4.0，过滤后备用。

5.根据权利要求1所述饲料添加剂中纽甜含量的高效液相色谱测定方法，其特征在于， 液相色谱检测过程中控制柱温为室温，流动相流速为0.8~1.5mL/min，进样量为20~30μL。

6.根据权利要求1所述饲料添加剂中纽甜含量的高效液相色谱测定方法，其特征在于， 步骤3）将饲料添加剂与水按照3~5g：100mL的质量体积比混合，并进行超声处理20~60 min，得到样品处理液。

7.根据权利要求1所述饲料添加剂中纽甜含量的高效液相色谱测定方法，其特征在于， 所述饲料添加剂为甜味剂。