[发明专利]一种磷霉素降解菌筛选及其菌剂制备方法和该菌剂的应用

权利要求书

1.一种磷霉素抗生素降解菌的筛选方法，其特征在于所述方法中使用的富集培养基、 筛选培养基和驯化培养基是除了营养元索，以磷霉素作为唯一碳源的培养基。

2.根据权利要求1所述的一种磷霉索抗生索降解菌的筛选方法，其特征在于所述含磷 霉索的培养液中磷霉素的浓度为100-200ppm，其余为营养元素和水。

3.根据权利要求1所述的一种磷霉素抗生素降解菌的筛选方法，其特征在于所述营养 元索的成份和浓度如下：(NH₄)₂SO₄1000-1200mg/L，KH₂PO₄800-1000mg/L，K₂HPO₄200-300mg/ L，MgSO₄·7H₂O500-600mg/L，FeSO₄10-20mg/L，CaCl₂50-70mg/L.使用时稀释25-50倍左右。

4.根据权利要求1所述的一种磷霉索抗生索降解菌的筛选方法，其特征在于具体步骤 为：

1)菌源的采集

以处理含有磷霉素抗生素制药废水污水处理厂的活性污泥为磷霉素降解土著菌的菌 源.

2)驯化

取自污水处理厂的活性污泥，先空曝2d后静置12h，排出上清液，加入体积3L的反应器 中，温度控制在25-30℃，pH控制在6.5-7.5左右，设置转速为150-200r/min，以磷霉素钠作 为唯一碳源，对活性污泥进行驯化.

3)菌种的纯化

a)取驯化后的活性污泥的上清液，按照不同稀释倍数涂布到筛选培养基平板上，35℃ 恒温培养48h；

b)重复上述步骤，直至得到形态单一的纯化菌落；

c)纯化后的菌落按种于菌种保藏培养基斜面上，35℃恒温培养48h后，保存于-20℃冰 箱。

5.根据权利要求4所述的一种磷霉素抗生索降解菌的筛选方法，其特征在于：所述筛选 培养基为：无机盐营养液和磷霉素钠和营养盐、微量元索制备.

其中无机营养液由以下营养元素组成：

营养液；(NH₄)₂SO₄1000mg/L，KH₂PO₄800mg/L，K₂HPO₄200mg/L，MgSO₄·7H₂O500mg/L， FeSO₄10mg/L，CaCl₂50mg/L；

微量元索：NiSO₄32mg/L，Na₂BO₇·H₂O7.2mg/L，(NH₄)₆Mo₇O24·H₂O14.4mg/L， ZnCl₂23mg/L，CoCl₂·H₂O21mg/L，CuCl₂·2H₂O10mg/L，MnCl₂·4H₂O30mg/L.每升培养基加 50ml无机营养液、50ml微量元素、15g琼脂，121℃灭菌30min，冷却后加入200mg/L磷霉素.

所述菌种保藏培养基为：

胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化钠10g、950ml纯水、15g琼脂.pH＝7.0-7.2，121℃灭 菌30min。

6.一种磷霉索抗生索降解菌，其特征在于由权利要求1-5所述方法制备得到。

7.一种磷霉素抗生索降解菌菌剂，其特征在于：由权利要求6所述方法制备。