[发明专利]一种百日咳杆菌培养基

权利要求书

1.一种百日咳杆菌培养基，其特征在于：由以下原料组成：1000ml水、5-8g谷氨酸钠、4-8g植物蛋白胨、1-2g氯化钠、0.1-0.2g硫酸镁、2-3gL-胱氨酸、0.2-0.3g烟酸、0.5-1g抗坏血酸、5-10g还原型谷胱甘肽、0.5-1.0gFeSO4·7H2O、20-40g芦荟胶、25-35g琼脂、4-5g橄榄油、5-10g青稞提取物。

2.根据权利要求1所述的一种百日咳杆菌培养基，其特征在于：由以下原料组成：1000ml水、6g谷氨酸钠、6g植物蛋白胨、1g氯化钠、0.2g硫酸镁、2gL-胱氨酸、0.3g烟酸、1g抗坏血酸、8g还原型谷胱甘肽、1.0gFeSO4·7H2O、30g芦荟胶、30g琼脂、4g橄榄油、10g青稞提取物。

3.一种培养百日咳杆菌的方法，其特征在于，采用权利要求1或2所述的百日咳杆菌培养基，包括以下步骤：

S1.菌种开启：启开百日咳工作种子批菌种，接种于固体培养基，35℃培养60小时；

S2.传二代培养：将步骤S1开启的百日咳菌种接种于二代摇瓶液体培养基中，起始OD600值为0.2，35℃培养25小时，为二代菌种菌液；

S3.传三代培养：将二代菌种菌液接种于三代摇瓶液体培养基中，起始OD600值为0.2，35℃培养25小时，为三代菌种菌液；

S4.发酵罐培养：将三代菌种菌液接种于发酵罐液体培养基中，通气搅拌培养，培养温度为35℃，培养时间为50小时，培养至发酵液pH值为7.0～7.5，OD600值为5.0～10，将发酵液下罐，通过分离纯化制备百日咳抗原。