[发明专利]一种固定化葡萄糖氧化酶及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种固定化葡萄糖氧化酶的制备方法，其特征在于包含如下步骤：

(1)将纤维素溶解于NaOH-Urea水溶液中，在搅拌条件下，加入纳米Fe₃O₄，加水再生，产物分离并洗涤，得到磁性纤维素；

(2)将步骤(1)制得的磁性纤维素与硝酸锌溶液混合搅拌5～30min，得到混合溶液；

(3)在步骤(2)制得的混合溶液中加入2-甲基咪唑溶液，搅拌反应0.5～24h；得到载体磁性纤维素-二甲基咪唑锌盐；

(4)将步骤(3)制得的载体磁性纤维素-二甲基咪唑锌盐与葡萄糖氧化酶液混合在0～25℃的温度下固定化1～12h，得到固定化葡萄糖氧化酶。

2.根据权利要求1所述的固定化葡萄糖氧化酶的制备方法，其特征在于：

步骤(1)中所述的纳米Fe₃O₄的制备方法，包含如下步骤：

将FeCl₃·6H₂O和FeCl₂·4H₂O溶解在水中，调节溶液pH为9～12；然后将混合溶液在30℃下反应0.5～3h，得到纳米Fe₃O₄。

3.根据权利要求1所述的固定化葡萄糖氧化酶的制备方法，其特征在于：

所述步骤(1)中NaOH-Urea水溶液为包含如下按质量百分比计的组分：7％NaOH和12％Urea。

4.根据权利要求1所述的固定化葡萄糖氧化酶的制备方法，其特征在于：

步骤(1)中所述的溶解的温度为-12℃以下。

5.根据权利要求1所述的固定化葡萄糖氧化酶的制备方法，其特征在于：

步骤(1)中所述的纤维素与纳米Fe₃O₄的质量比为1：(0.1～3)。

6.根据权利要求1所述的固定化葡萄糖氧化酶的制备方法，其特征在于：

步骤(2)中所述的硝酸锌溶液中的硝酸锌与磁性纤维素的质量比为1：(0.5～2)。

7.根据权利要求1所述的固定化葡萄糖氧化酶的制备方法，其特征在于：

步骤(3)中所述的2-甲基咪唑溶液中的2-甲基咪唑与步骤(2)中硝酸锌溶液中的硝酸锌的摩尔比为4:1。

8.根据权利要求1所述的固定化葡萄糖氧化酶的制备方法，其特征在于：

步骤(4)中所述的固定化葡萄糖氧化酶中，葡萄糖氧化酶的负载量为20mg/g～300mg/g磁性纤维素-二甲基咪唑锌盐。

9.一种固定化葡萄糖氧化酶，其特征在于：通过权利要求1～8任一项所述的制备方法制备得到。

10.权利要求9所述的固定化葡萄糖氧化酶在酶制剂领域中的应用。