[发明专利]一种蛋白分子活性分离与表征联用系统

说明书

技术领域

本申请涉及蛋白分离技术领域，特别是涉及一种蛋白分子活性分离与表 征联用系统。

背景技术

快速发展的蛋白质组学，需要研究先进的分离与表征联用系统。这种系 统中的分离技术应具有分离迅速，选择性高和应用范围广泛等优点，同时在 分离纯化过程中不破坏目标蛋白的活性和稳定性；而这种系统中的表征技术 则应该有操作简单，表征灵敏度高等优点。

常用的传统蛋白分离方法中，电泳技术需要加入表面活性剂，离子交换 色谱方法需要加入盐缓冲液，液相色谱方法需加入有机溶液，且在固定相色 谱柱中进行，这些都会破坏蛋白分子的立体结构，且容易诱导蛋白组分的分 裂。

常用的传统蛋白表征方法，基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 (MALDI-TOFMS)技术需要将分离的蛋白样品分离进行后处理，操作时间 长，操作不方便。

因此，建立一套不破坏蛋白分子结构和活性，且操作简单方便，分离表 征迅速，表征结果准确的分离表征联用系统非常有必要。

发明内容

有鉴于此，本申请实施例提供一种蛋白分子活性分离与表征联用系统， 以使蛋白组分的分离与表征不破坏蛋白分子结构和活性，且操作简单方便， 分离表征迅速，表征结果准确。

为了实现上述目的，本申请实施例提供的技术方案如下：

一种蛋白分子活性分离与表征联用系统，包括：

非对称流场流分离仪和电喷雾质谱仪，其中，

所述非对称流场流分离仪的出样口通过管路与所述电喷雾质谱仪的进样 口连接。

优选地，所述非对称流场流分离仪中包括：

分离腔室，所述分离腔室由上壁面、垫片以及下壁面组成，所述上壁面 为透明的玻璃板，所述上壁面用于在进行蛋白组分的分离时观察有色样品在 腔室聚集及流动情况，所述下壁面包括多孔的半透膜，所述下壁面用于使进 行蛋白组分分离的流动相通过，所述半透膜用于截留蛋白组分。

优选地，所述半透膜为纤维材料半透膜或聚醚砜材料半透膜。

优选地，在所述上壁面和所述下壁面之间还包括腔室垫片，所述腔室垫 片中设置有用于聚集所分离的蛋白组分的中空空间，所述分离腔室的厚度根 据所分离的蛋白组分，通过更换不同厚度的腔室垫片来调整。

优选地，还包括：

流动相处理装置、进样泵、聚集泵、横流泵、进样器和紫外检测器，其 中，

所述流动相处理装置通过管路与所述进样泵相连，所述进样泵与所述进 样器相连，所述进样器与所述分离腔室的第一进样口相连，所述分离腔室的 出样口与所述紫外检测器的入口相连，所述紫外检测器的出口通过管路与所 述电喷雾质谱仪的进样口相连；

所述流动相处理装置通过管路与所述聚集泵相联，所述聚集泵与所述分 离腔室的第二进样口相连；

所述横流泵与所述分离腔室串联后经过管路通入废液瓶。

优选地，所述流动相处理装置中的流动相为：

加入可挥发性铵盐的电喷雾质谱级水，或加入可挥发性铵盐并经过0.1 mm滤膜过滤的超纯水。

优选地，所述流动相处理装置包括流动相平、流动相采集装置和流动相 除气泡装置，所述流动相平、流动相采集装置和所述流动相除气泡装置通过 管路依次连接。

优选地，所述紫外检测器为可拆除的紫外检测器，并且在所述紫外检测 器被拆卸时，所述分离腔室的出样口直接与所述电喷雾质谱仪连接。

优选地，所述管路为管径0.125mm的聚醚醚酮管。

优选地，所述电喷雾质谱仪为电喷雾离子化质谱仪，所述电喷雾离子化 质谱仪中的质量分析器为离子阱分析器，所述电喷雾离子化质谱仪的电喷雾 离子源入口作为所述电喷雾离子化质谱仪的进样口与所述非对称流场流分离 仪的出样口通过管路连接。